目的 觀察單免疫球蛋白白細胞介素1受體相關(guān)蛋白(SIGIRR)對高遷移率族蛋白B1(HMGB1)誘導的人肺泡上皮細胞株A549炎性反應的影響。
方法 構(gòu)建含有SIGIRR cDNA全長的真核表達載體pCDNA3.1(+),瞬時轉(zhuǎn)染人Ⅱ型肺泡上皮細胞來源的A549細胞,使SIGIRR在A549細胞中過表達,采用Western blot和RT-PCR法檢測其表達。HMGB1刺激A549細胞后,雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)檢測轉(zhuǎn)染前后核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)轉(zhuǎn)錄活性的改變,ELISA檢測轉(zhuǎn)染前后炎癥因子腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細胞介素1β(IL-1β)蛋白表達水平的變化。
結(jié)果 轉(zhuǎn)染SIGIRR表達載體的A549細胞,其SIGIRR表達量顯著上升。HMGB1刺激后,雙熒光素酶報告系統(tǒng)檢測發(fā)現(xiàn),NF-κB轉(zhuǎn)錄活性明顯升高,而轉(zhuǎn)染SIGIRR表達載體后NF-κB轉(zhuǎn)錄活性下降。ELISA實驗結(jié)果表明,過表達SIGIRR的A549細胞在接受HMGB1刺激后其炎癥因子TNF-α及IL-1β蛋白表達水平明顯低于對照組。
結(jié)論 SIGIRR表達上調(diào)可以抑制HMGB1誘導的A549細胞產(chǎn)生炎癥因子TNF-α和IL-1β。A549細胞轉(zhuǎn)染前后NF-κB轉(zhuǎn)錄活性的改變提示SIGIRR的抗炎作用可能與其參與NF-κB轉(zhuǎn)錄活性的調(diào)控有關(guān)。
引用本文: 黃勛,梁曉華,田豐,姜濤. SIGIRR對HMGB1誘導的A549細胞炎性反應的影響. 中國呼吸與危重監(jiān)護雜志, 2011, 10(6): 577-580. doi: 復制
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