目的 探討環(huán)狀精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-D-脯氨酸-賴氨酸短肽(Cyclo-RGDfK)能否提高去細胞瓣對肌成纖維細胞(myofibroblast)的黏附性能,以及RGD肽對Integrin αVβ3基因表達的調控。 方法 組織塊培養(yǎng)法獲取大鼠主動脈壁肌成纖維細胞(myofibroblast),免疫熒光染色檢測波形蛋白(Vimentin)和α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)分子在培養(yǎng)myofibroblast中的表達。將去細胞瓣隨機分為3組(每組7個),A組:去細胞瓣未接受任何處理;B組:去細胞瓣與交聯(lián)劑1-乙基-3-(二甲基氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)反應36h;實驗組:去細胞瓣與EDC反應36h后,再與Cyclo-RGDfK反應24h,使RGD肽共價結合于去細胞瓣。將第5代myofibroblast分別接種至各組瓣膜上。HE染色和掃描電子顯微鏡觀察細胞黏附增殖狀況,半定量逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測Integrin αVβ3基因在各組的表達。 結果 免疫熒光染色顯示原代培養(yǎng)的myofibroblast生長良好,高表達Vimentin和αSMA分子。HE染色和掃描電子顯微鏡顯示myofibroblast在實驗組的生長好于A組和B組,半定量PCR示Integrin αVβ3 mRNA在實驗組的表達高于A組和B組,差異有統(tǒng)計學意義(P lt;0.05),而A組與B組比較差異無統(tǒng)計學意義(P=0.900)。 結論 Cyclo-RGDfK促進myofibroblast在去細胞瓣上黏附,此效應可能與RGD肽上調Integrin αVβ3基因表達有關。
引用本文: 董毅,董念國,史嘉瑋,等. 環(huán)狀RGDfK肽對肌成纖維細胞整合素αVβ3表達調控的實驗研究. 中國胸心血管外科臨床雜志, 2008, 15(5): 360-364. doi: 復制