目的 二膦酸鹽類藥物可抑制骨重塑，通過觀察阿侖膦酸鈉（alendronate，ALN）對(duì)IL-1β 體外誘導(dǎo)培養(yǎng)的大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的影響，探討ALN 治療骨性關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）的可行性。 方法 取15 只1 月齡SPF 級(jí)SD 大鼠（雌雄不限，體重100 ～ 150 g）膝關(guān)節(jié)軟骨，體外培養(yǎng)軟骨細(xì)胞并傳至第3 代。倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)并進(jìn)行鑒定。將第3 代軟骨細(xì)胞分為3 組：空白對(duì)照組（A 組）軟骨細(xì)胞用常規(guī)DMEM 完全培養(yǎng)液培養(yǎng)5 d；IL-1β 誘導(dǎo)組（B 組）軟骨細(xì)胞以10 ng/mL 重組人IL-1β 培養(yǎng)2 d 后更換為常規(guī)DMEM 完全培養(yǎng)液培養(yǎng)3 d；IL-1β 誘導(dǎo)后加ALN 培養(yǎng)組（C 組）軟骨細(xì)胞以10 ng/mL 重組人IL-1β 培養(yǎng)2 d 后更換為濃度為1 × 10-6mol/L 的ALN 培養(yǎng)3 d。培養(yǎng)后取各組細(xì)胞進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色及實(shí)時(shí)PCR 檢測(cè)，觀察細(xì)胞中Ⅱ型膠原（collagen type Ⅱ，Col Ⅱ）、基質(zhì)金屬蛋白酶13（matrix metalloproteinase 13，MMP-13）和β- 連環(huán)蛋白（β-catenin）的表達(dá)水平。 結(jié)果 甲苯胺藍(lán)染色示培養(yǎng)的細(xì)胞呈異染性，證實(shí)為軟骨細(xì)胞。免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示：A、B、C 組Col Ⅱ表達(dá)積分吸光度（IA）值分別為15.377 0 ± 0.571 8、5.463 2 ± 0.450 4、10.290 7 ± 0.499 2，C 組高于B 組，但低于A 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；MMP-13 表達(dá)IA 值分別為2.777 5 ± 0.199 6、6.998 1 ± 0.329 7、3.068 6 ± 0.205 6，C 組明顯低于B 組（P lt; 0.05），但與A 組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）；β-catenin 表達(dá)IA 值分別為4.390 3 ± 0.551 9、11.799 9 ± 0.348 7、6.611 7 ± 0.381 8，C 組低于B 組，但高于A 組， 差 異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。實(shí)時(shí)PCR 檢測(cè)示，C 組Col Ⅱ mRNA 表達(dá)高于B 組，MMP-13 及β-catenin 的mRNA 表達(dá)低于B 組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；Col Ⅱ和β-catenin mRNA 表達(dá)高于A 組，MMP-13 mRNA表達(dá)低于A 組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 ALN 可能通過抑制IL-1β 誘導(dǎo)的大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中Col Ⅱ的降解并下調(diào)MMP-13 及 β-catenin 因子的表達(dá)，對(duì)軟骨細(xì)胞具有一定的保護(hù)作用。
引用本文： 王哲彥,王文雅,張柳,田發(fā)明,程潭,楊林. 阿侖膦酸鈉對(duì)IL-1β 體外誘導(dǎo)培養(yǎng)的大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(1): 50-55. doi: 復(fù)制