• 中南大學湘雅三醫(yī)院肝膽外科(長沙,413000);

人羊膜上皮細胞(human amniotic epithelial cells,hAECs)具有干細胞特性及分化為成熟肝細胞的潛能,有望成為肝細胞移植理想的種子細胞。研究hAECs 移植入肝受損裸小鼠脾臟后的存活、遷移情況,探討其肝細胞特性的表達。 方法 取順產(chǎn)產(chǎn)婦自愿捐贈胎盤分離培養(yǎng)hAECs。30 只6 ~ 8 周齡裸小鼠,雌雄各半,體重20 ~ 22 g。將實驗動物隨機分為A、B、C 3 組,每組10 只。A、C 組制備肝切除(常規(guī)切除2/3 肝)模型,B 組僅開腹但未行肝葉切除;術(shù)后A、B 組分別自脾下極移植細胞密度為5 × 106 個 /mL 腺相關(guān)病毒(adeno-associated virus,AAV)載體介導綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因標記的第3 代hAECs 0.2 mL,C 組注射等量生理鹽水。4 周后處死動物,取肝、脾、心、肺、腦、腎行大體觀察,冰凍切片行組織學及免疫熒光檢測,追蹤hAECs 存活、遷移及肝細胞特性表達。 結(jié)果 3 組裸小鼠肝及脾組織未見異常癌性結(jié)節(jié)及腫塊,HE 染色未見腫瘤細胞。A 組肝及脾組織HE 染色可見大量類圓形、胞質(zhì)少、核大而深染的細胞;B、C 組肝、脾組織及3 組腎、心、肺、腦組織均未見異常細胞。熒光顯微鏡下A 組肝、脾組織中均發(fā)現(xiàn)綠色熒光信號的hAECs,且大部分表達白蛋白;B、C 組肝、脾組織及3 組腎、心、肺、腦組織未見綠色熒光細胞。 結(jié)論 AAV- GFP 轉(zhuǎn)染后的hAECs 移植入肝受損裸小鼠體內(nèi)可存活并保持部分肝細胞特性。

引用本文: 羅宏武,黃湘俊,黃飛舟,劉潯陽. 人羊膜上皮細胞橫向分化及脾內(nèi)移植的初步研究. 中國修復重建外科雜志, 2011, 25(2): 144-148. doi: 復制

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