目的 檢測聚乙烯醇（polyvinyl alcohol，PVA）/ 柞蠶絲素蛋白（wild antheraea pernyi silk fibroin，WSF）電紡膜與肌腱細(xì)胞的細(xì)胞相容性，探討其作為肌腱組織工程支架材料的可行性。 方法 以質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98% 的甲酸為溶劑，配制濃度均為11% 的WSF 溶液、PVA 溶液及PVA/WSF（質(zhì)量配比為9 ∶ 1）溶液，采用電紡絲技術(shù)制備WSF、PVA及PVA/WSF 電紡膜，掃描電鏡觀察電紡成絲情況。取5 只3 日齡SD 大鼠尾腱，體外分離培養(yǎng)肌腱細(xì)胞并傳至第3 代進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。取濃度為1 × 106 個/ mL 肌腱細(xì)胞分別與PVA 及PVA/WSF 電紡膜復(fù)合培養(yǎng)，4、12 h 采用MTT 法測量細(xì)胞黏
附率。取濃度為4.5 × 103 個/mL 肌腱細(xì)胞，分別于PVA、1/2 PVA、1/4 PVA、PVA/WSF、1/2 PVA/WSF、1/4 PVA/WSF 電紡膜浸提液中培養(yǎng)，MTT 法測定培養(yǎng)1、3、5、7 d 的吸光度（A）值，并進(jìn)行毒性等級評價(jià)。取PVA、PVA/WSF 電紡膜分別與細(xì)胞密度為1 × 106 個/ mL 的肌腱細(xì)胞懸液100 μL 復(fù)合培養(yǎng)制備細(xì)胞- 材料復(fù)合物，7 d 后行HE 染色觀察，1、3、5、7 d行掃描電鏡觀察。 結(jié)果 WSF 甲酸溶液無法電紡成絲，PVA 和PVA/WSF 甲醛溶液均可成功電紡成絲。肌腱細(xì)胞與PVA、PVA/WSF 電紡膜復(fù)合培養(yǎng)4 h 后，其細(xì)胞黏附率分別為26.9% ± 0.4%、87.0% ± 1.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=100.400，P=0.000）；復(fù)合培養(yǎng)12 h 后，其細(xì)胞黏附率分別為35.2% ± 0.6%、110.0% ± 1.7%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=42.500，P=0.000）。體外浸提液毒性評價(jià)結(jié)果顯示，培養(yǎng)后1、3、5、7 d 各種電紡膜間細(xì)胞A 值比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；1/2 PVA和1/4 PVA 浸提液細(xì)胞毒性等級差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。細(xì)胞- 材料復(fù)合物的組織學(xué)及掃描電鏡觀察顯示肌腱細(xì)胞均可黏附于PVA、PVA/WSF 電紡膜表面，但PVA/WSF 電紡膜上細(xì)胞較多。 結(jié) 論 PVA/WSF 電紡膜支架材料具有良好的細(xì)胞相容性，有望成為肌腱組織工程的理想支架。
引用本文： 吳琳琳,李敏,趙晉,陳登龍,周志華. 聚乙烯醇/ 柞蠶絲素蛋白材料作為肌腱組織工程支架材料的初步研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(2): 181-186. doi: 復(fù)制