目的 研究人羊水來源干細(xì)胞（human amniotic fluid colony derived stem cells，hAFCSCs）是否參與小鼠肌肉損傷修復(fù)過程，探討應(yīng)用hAFCSCs 治療肌肉損傷的方法及可行性。 方法 B 超引導(dǎo)下穿刺抽取人孕中期羊水，體外分離、培養(yǎng)得到hAFCSCs，取第6 ～ 8 代細(xì)胞備用，同時(shí)提取總RNA 行RT-PCR 鑒定干細(xì)胞相關(guān)基因。取16 只6 ～ 8周齡Nod/Scid 小鼠，體重20 ～ 24 g，利用心肌毒素聯(lián)合X 線照射建立雙側(cè)脛骨前肌肌肉損傷模型，右側(cè)脛骨前肌內(nèi)注射hAFCSCs（3.3 × 107 個(gè)/mL）30 μL 作為實(shí)驗(yàn)組，左側(cè)脛骨前肌同法注射等量完全培養(yǎng)液（含15%FBS、18%Chang B2%Chang C、1% 青鏈霉素、1%L- 谷氨酰胺的α-MEM 培養(yǎng)基）作為對(duì)照組。細(xì)胞移植術(shù)后2、4 周各處死小鼠8 只，取材行肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體（c-Met）、成肌調(diào)節(jié)因子（Myf-5）、層粘連蛋白（Laminin）、結(jié)蛋白（Desmin）與人特異性細(xì)胞核有絲分裂器（NuMa）組織免疫雙重?zé)晒馊旧^察。 結(jié)果 原代hAFCSCs 培養(yǎng)5 ～ 7 d 后可見細(xì)胞克隆形成；8 ～ 10 d 后可挑取細(xì)胞形態(tài)均一的克隆進(jìn)行穩(wěn)定傳代，6 ～ 8 代后可獲得足量的干細(xì)胞。RT-PCR 檢測(cè)示所獲得hAFCSCs 體外擴(kuò)增培養(yǎng)至第6 代仍表達(dá)干細(xì)胞相關(guān)基因。細(xì)胞移植術(shù)后2 周免疫雙重?zé)晒馊旧?，?shí)驗(yàn)組脛骨前肌內(nèi)檢測(cè)到NuMa 表達(dá)，未檢測(cè)到hAFCSCs 表達(dá)肌源性細(xì)胞相關(guān)表型；術(shù)后4 周，實(shí)驗(yàn)組脛骨前肌內(nèi)檢測(cè)到NuMa 表達(dá)，部分細(xì)胞同時(shí)表達(dá)NuMa和c-Met、Myf-5，部分肌纖維同時(shí)表達(dá)NuMa 和Desmin、Laminin。術(shù)后2、4 周，對(duì)照組脛骨前肌均未檢測(cè)到NuMa 表達(dá)。 結(jié)論 hAFCSCs 體外培養(yǎng)后移植到小鼠肌肉損傷部位，可參與損傷肌肉的修復(fù)過程。
引用本文： 馬曉榮,張勝利,尚亞峰,高同斌,王雪,陳方,周君梅. 人羊水來源干細(xì)胞參與小鼠損傷肌肉修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(7): 842-847. doi: 復(fù)制