目的 觀察肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（hepatocyte growth factor，HGF）修飾的BMSCs 對(duì)大鼠同種異體肝移植后免疫排斥反應(yīng)的影響，探討其誘導(dǎo)免疫耐受的機(jī)制。 方法 3 ～ 4 周齡清潔級(jí)雄性SD 大鼠8 只，體重75 ～ 85 g，用于分離培養(yǎng)BMSCs；成年清潔級(jí)雄性SD 大鼠64 只，體重200 ～ 250 g，作為供體；成年清潔級(jí)雄性Wistar 大鼠64 只，體重230 ～ 280 g，作為受體。建立穩(wěn)定的同種異體肝移植動(dòng)物模型并隨機(jī)分為4 組（n=16），A、B、C、D 組分別立即經(jīng)門靜脈注入1 mL 生理鹽水、1 mL 細(xì)胞密度為2 × 106 個(gè)/mL 的BMSCs、1 mL 細(xì)胞密度為2 × 106 個(gè)/mL 的BMSCs/ 綠色熒光蛋白、1 mL 細(xì)胞密度為2 × 106 個(gè)/mL 的BMSCs/hHGF。術(shù)后作實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生存曲線分析；術(shù)后7 d 檢測(cè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝功能，并取肝臟組織行病理組織學(xué)觀察，RT-PCR 檢測(cè)肝組織內(nèi)hHGF mRNA 表達(dá)，ELISA 法檢測(cè)血清中hHGF、IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ 細(xì)胞因子的表達(dá)，TUNEL 法檢測(cè)肝組織內(nèi)細(xì)胞凋亡情況，免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)增殖細(xì)胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）在肝組織內(nèi)的表達(dá)。 結(jié)果 D 組生存時(shí)間顯著高于A、B、C 組（P  lt; 0.01）；B、C 組生存時(shí)間明顯高于A 組（P  lt; 0.01），但B、C 組間生存時(shí)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P  gt; 0.05）。RT-PCR 示檢測(cè)D 組肝組織內(nèi)有hHGF mRNA 表達(dá)，ELISA 檢測(cè)血清中hHGF 水平達(dá)（6.2 ± 1.0）ng/mL。相比B、C 組，D 組療效更顯著，肝功能明顯改善，病理學(xué)無急性排斥反應(yīng)或僅為輕度；IL-2、IFN-γ 水平降低，IL-4、IL-10 水平升高，細(xì)胞凋亡明顯減少，PCNA 表達(dá)顯著升高，除IL-4 水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P  gt; 0.05）外，其余指標(biāo)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P  lt; 0.05）。 結(jié)論 通過門靜脈輸注BMSCs/hHGF 至大鼠同種異體肝移植模型能成功誘導(dǎo)免疫耐受。與單純應(yīng)用BMSCs 相比，BMSCs/hHGF在移植肝局部形成高濃度hHGF 免疫抑制微環(huán)境，能更顯著抑制急性排斥反應(yīng)，延長(zhǎng)移植受體存活時(shí)間。BMSCs/hHGF的免疫抑制作用與誘導(dǎo)Th1 細(xì)胞向Th2 細(xì)胞偏移、減少肝細(xì)胞凋亡、促進(jìn)肝細(xì)胞增殖有關(guān)。

引用本文： 朱金海,陳燕凌. 人肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子修飾的BMSCs 對(duì)大鼠同種異體肝移植免疫排斥的影響. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(7): 871-876. doi: 復(fù)制