目的 觀察經(jīng)蛛網(wǎng)膜下腔不同次數(shù)移植的 BMSCs 在 Wistar 大鼠損傷脊髓內(nèi)的存活、遷移及對大鼠脊髓損傷（spinal cord injury，SCI）修復(fù)的作用，探討 BMSCs 移植的最佳次數(shù)。? 方法 8 只 2 月齡 Wistar 大鼠，體重約120 g。取股骨骨髓體外分離培養(yǎng)第 2 代 BMSCs，用 Hoechst 33342 標記。另取 75 只成年 Wistar 大鼠體重約 220 g，采用改良Allen法制備T9、 10 SCI模型。隨機分為5組（n=15）， A組經(jīng)蛛網(wǎng)膜下腔置管移植1次1 × 107個/mL BMSCs懸液0.1 mL（術(shù)后 1 周）， B 組 2 次（術(shù)后 1、 3 周）， C 組 3 次（術(shù)后 1、 3、 5 周）， D 組 5 次（術(shù)后 1、 3、 5、 7、 9 周）， E 組于術(shù)后 1、 3、 5、 7、9 周各注入 0.2 mL PBS 作為空白對照。SCI 術(shù)后不同時間點行大鼠后肢 Basso-Beattie-Bresnahan（BBB）評分評價神經(jīng)功能狀況，并行熒光顯微鏡、 HE 染色、免疫組織化學(xué)染色觀察 BMSCs 在體內(nèi)遷移、存活及分化情況。? 結(jié)果 術(shù)后 3 周，A ～ D 組 BBB 評分均有明顯增加，與 E 組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.01）。術(shù)后 7、9、12 周，C、D 組 BBB 評分均明顯高于 A、B 組（P lt; 0.01），B 組高于 A 組（P lt; 0.01）。各時間點 C、D 組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）。熒光顯微鏡觀察示術(shù)后 3 周，移植的 BMSCs 存活于損傷脊髓邊緣， A 組細胞數(shù)達高峰；隨后 A 組細胞數(shù)逐漸減少， B、 C、 D 組分別于術(shù)后5、 7、 7周細胞數(shù)達高峰后逐漸下降。12周C、 D組存活細胞數(shù)顯著多于A、 B組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.01）；各時間點C、 D組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）。 HE染色示術(shù)后3周損傷脊髓形成的空洞A、 B、 C、 D組逐漸減小，12 周 C、 D 組空洞最小， A、 B 組次之， E 組最大。免疫組織化學(xué)染色示神經(jīng)絲蛋白 200（neuroflament 200， NF-200）細胞數(shù)變化趨勢與 BMSCs 存活細胞數(shù)類似。術(shù)后 12 周 NF-200 陽性細胞數(shù)在 C、D 組表達較 A、B 組明顯；神經(jīng)元樣細胞發(fā)出的神經(jīng)絲穿過損傷區(qū)在C、 D組最明顯， A、 B組較少。 ? 結(jié)論 多次移植BMSCs更有利于SCI修復(fù)，移植以3次為最好。
引用本文： 李輝映,文益民,羅亞麗,藍旭,汪大彬,孫振剛,胡凌云. 不同次數(shù)移植 BMSCs 修復(fù)脊髓損傷的比較研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2010, 24(2): 180-184. doi: 復(fù)制
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