目的 通過檢測熒光微球655（quantum dot 655，QD655）標(biāo)記SD 大鼠BMSCs 的體外細(xì)胞毒性、細(xì)胞增殖、細(xì)胞貼附性以及標(biāo)記率，探討QD655 標(biāo)記BMSCs 及其示蹤的可行性。 方法 收集2 周齡健康SD 大鼠股骨和脛骨骨髓，貼壁培養(yǎng)BMSCs。取第3 代BMSCs 采用QD655 標(biāo)記作為實驗組，以未標(biāo)記BMSCs 作為對照組，采用錐蟲藍(lán)拒染法檢測細(xì)胞存活率，MTT 法觀察QD655 對細(xì)胞增殖性的影響；取實驗組BMSCs 向成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)2 周，采用茜素紅、ALP 染色定性鑒定細(xì)胞成骨分化能力，實時熒光定量PCR 鑒定標(biāo)記對細(xì)胞成骨分化的影響；分別在標(biāo)記后即刻、1、2、4、6 周采用熒光顯微鏡動態(tài)檢測實驗組BMSCs 陽性標(biāo)記率；掃描電鏡觀察實驗組細(xì)胞在膠原/ 生物活性玻璃復(fù)合材料上的貼附性。 結(jié)果 實驗組與對照組細(xì)胞存活率均 gt;90%，比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）；培養(yǎng)1、3、5、7、9 d，兩組細(xì)胞增殖率比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）。實驗組BMSCs 經(jīng)成骨誘導(dǎo)分化2 周后，茜素紅及ALP 染色均呈陽性，實時熒光定量PCR 檢測實驗組BMSCs 的骨橋蛋白、骨鈣素、Ⅰ型膠原、ALP、BMP-2 mRNA 較對照組成倍數(shù)高表達(dá)。實驗組BMSCs 標(biāo)記后即刻陽性標(biāo)記率達(dá)96.50% ± 1.59%，隨著標(biāo)記時間延長標(biāo)記率下降，標(biāo)記后1、2、4、6 周標(biāo)記率分別為93.30% ± 1.51%、72.40% ± 2.90%、40.10% ± 3.60%、10.00% ± 1.70%，對照組各時間點陽性標(biāo)記率均為0。掃描電鏡觀察示實驗組標(biāo)記后細(xì)胞和材料貼附良好。 結(jié)論 QD655 對大鼠BMSCs 標(biāo)記時間長，標(biāo)記率及安全性高，是一種良好標(biāo)記 物。
引用本文： 姜曉銳,張鑫鑫,楊科躍,江汕,金丹,王丹,裴國獻(xiàn). 熒光微球體外標(biāo)記大鼠BMSCs 的初步研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2010, 24(6): 744-748. doi: 復(fù)制
版權(quán)信息： ?四川大學(xué)華西醫(yī)院華西期刊社《中國修復(fù)重建外科雜志》版權(quán)所有，未經(jīng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、改編