目的 初步確立hBMSCs 的二維生物打印方法，實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞噴射過(guò)程的控制并保持打印后細(xì)胞活力。 方法 取健康志愿者骨髓5 mL，常規(guī)培養(yǎng)hBMSCs 至第2 代，調(diào)整為1 × 106 個(gè)/mL 單細(xì)胞懸液。實(shí)驗(yàn)分3 組：打印組1 細(xì)胞先行碘化丙啶（propidium iodide，PI）熒光標(biāo)記，快速成型組織打印機(jī)進(jìn)行二維細(xì)胞打印，x 軸間隔300 μm，y 軸間隔1 500 μm，激光共聚焦顯微鏡觀察。打印組2 細(xì)胞未行PI 標(biāo)記，經(jīng)生物打印后培養(yǎng)2 h，Live/Dead viability Kit 測(cè)定細(xì)胞活力，激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞熒光染色情況；取1 份未經(jīng)Live/Dead viability Kit 測(cè)試的打印組2 細(xì)胞，培養(yǎng)7 d 后倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，貼壁后常規(guī)培養(yǎng)，動(dòng)態(tài)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。對(duì)照組除細(xì)胞懸液不行打印，其余操作同打印組2。 結(jié)果 打印組1 細(xì)胞激光共聚焦顯微鏡觀察，“細(xì)胞墨滴”在二維組織中規(guī)則且均勻分布，滿足二維設(shè)計(jì)細(xì)胞打印要求；每個(gè)“細(xì)胞墨滴”包含細(xì)胞15 ～ 35 個(gè)。打印組2 細(xì)胞經(jīng)活力測(cè)試，細(xì)胞孵育30 min 后激光共聚焦顯微鏡觀察顯示細(xì)胞熒光染色情況。對(duì)照組細(xì)胞活力與打印組2 無(wú)明顯區(qū)別。打印后細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)7 d，細(xì)胞可正常貼壁生長(zhǎng)，形態(tài)、生長(zhǎng)狀態(tài)良好。 結(jié)論 通過(guò)生物打印技術(shù)可實(shí)現(xiàn)hBMSCs 在二維平面上的定向、定量規(guī)則分布，并為進(jìn)一步的細(xì)胞三維打印乃至器官打印體系奠定基礎(chǔ)。
引用本文： 麻蓀香,柴崗,劉齊海,胡慶夕,周廣東,崔磊. hBMSCs 的生物打印初步研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(4): 497-500. doi: 復(fù)制
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