目的 研究成肌細(xì)胞移植治療假肥大型肌營養(yǎng)不良癥（duchenne muscular dystrophy，DMD）的效果，探討基因治療DMD 的方法及可行性。 方法 用多步酶消化法與差速貼壁法培養(yǎng)C57/BL10 小鼠成肌細(xì)胞，倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)。取第4 代細(xì)胞用5-BrdU 標(biāo)記。將24 只DMD 模型鼠——mdx 小鼠（4 ～ 6 周齡，雄性，體重13.8 ～ 24.6 g）隨機分為兩組（n=12），A 組經(jīng)尾靜脈分2 次（間隔2 周）注射1 × 106 個/mL 標(biāo)記后成肌細(xì)胞，B 組同法注射1 mL DMEM/F12 培養(yǎng)基為對照。術(shù)后4 周采用一次性游泳力竭實驗檢測小鼠運動能力，處死后取材行HE 染色及5-BrdU、結(jié)蛋白、抗肌萎縮蛋白（dystrophin，Dys）免疫組織化學(xué)染色觀察，并行圖像分析。 結(jié)果 原代成肌細(xì)胞培養(yǎng)5 ～ 7 d 后即可傳代，可獲得穩(wěn)定傳代及足量的細(xì)胞。A 組小鼠一次性游泳力竭時間為（60.72 ± 5.76）min，B 組為（47.77 ± 5.40） min，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P  lt; 0.01）。術(shù)后4 周HE 染色示A 組可見變成圓形且透明染色的肌細(xì)胞，肌纖維細(xì)胞核中心移位（centrally nucleated fibers，CNF）比例為67%；B 組肌纖維粗細(xì)不等，可見肥大、萎縮、變性和肌纖維壞死等改變，CNF 比例 gt; 80%。免疫組織化學(xué)染色示，A 組5-BrdU、結(jié)蛋白、Dys 表達(dá)均呈陽性，B 組少見表達(dá)或呈陰性表達(dá)。圖像分析結(jié)果顯示，A、B 組結(jié)蛋白積分吸光度（IA）值分別為489.70 ± 451.83 和71.15 ± 61.14，陽性面積占視野總面積的比值分 別為0.314 3 ± 0.197 3 和0.102 8 ± 0.062 8（P  lt; 0.05） ；Dys IA 值分別為5 424.64 ± 2 658.01 和902.12 ± 593.51（P  gt; 0.05）， 陽 性面積占視野總面積的比值分別為0.323 7 ± 0.117 7 和0.035 2 ± 0.032 9（P  lt; 0.05）。 結(jié)論 成肌細(xì)胞移植治療小鼠DMD 有一定的治療作用。

引用本文： 劉立斌,周紅雨. 成肌細(xì)胞移植治療假肥大型肌營養(yǎng)不良癥的實驗研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(10): 1224-1228. doi: 復(fù)制