目的 探索G蛋白偶聯(lián)受體激酶結(jié)合蛋白1(G protein coupledreceptor kinase interacting protein 1, GIT1)的RNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)(hairpin)(GIT1-RNAh)對成骨細胞遷移的影響，并分析其機制。方法 取培養(yǎng)至第6代的鼠成骨細胞，隨機分成兩組，分別用包含GIT1-RNAh(實驗組)和綠色熒光蛋白(green fluoresenceprotein, GFP)的RNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)(GFPRNAh)的腺病毒(對照組)感染12 h后，再將每組分成有、無血小板源性生長因子(platelet drived growth factor, PDGF)刺激的兩組。免疫熒光染色方法檢測成骨細胞內(nèi)源性GIT1蛋白表達和Paxillin的位置。 Western Blot檢測Paxillin的磷酸化。 構(gòu)建包含藍色熒光蛋白的GIT1-RNAh(CFP-GIT1-RNAh)實驗組和GFP-RNAh(CFP-GFP-RNAh)(對照組)， 免疫熒光雙染的方法檢測CFP-GIT1-RNAh和 CFP-GFP-RNAh對Paxillin位置的特異性作用。 用劃痕愈合法檢測GIT1-RNAh(實驗組)和GFP-RNAh(對照組) 腺病毒對成骨細胞在PDGF刺激下的遷移能力的影響。結(jié)果 免疫組織化學觀察，實驗組和對照組比較，明顯抑制成骨細胞內(nèi)源性的GIT1蛋白表達和擾亂Paxillin的分布。 Western Blot觀察，和對照組相比，實驗組明顯抑制了Paxiliin的磷酸化(P＜0.05)。劃痕愈合法檢測觀察，和對照組相比，實驗組明顯抑制成骨細胞的遷移。結(jié)論 GIT1-RNAh通過擾亂Paxillin的分布和其磷酸化從而抑制成骨細胞的遷移。

引用本文： 張寧,胡志毅,殷國勇,范衛(wèi)民,陶松年,王道新,董天華. G蛋白偶聯(lián)受體激酶結(jié)合蛋白1發(fā)夾結(jié)構(gòu)通過影響Paxillin的功能抑制成骨細胞遷移. 中國修復重建外科雜志, 2007, 21(1): 1-5. doi: 復制

版權(quán)信息： ?四川大學華西醫(yī)院華西期刊社《中國修復重建外科雜志》版權(quán)所有，未經(jīng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、改編