目的 探討微囊化神經生長因子(nerve growth factor,NGF)基因修飾的NIH3T3細胞復合組織工程真皮的可行性及其對急性創(chuàng)面愈合的影響。 方法 構建分泌型NGF真核表達質粒pcDNA3.1+/NGF并導入NIH3T3細胞,篩選出穩(wěn)定表達的細胞株,將此細胞包入海藻酸鈉多聚賴氨酸海藻酸鈉微囊中培養(yǎng)。以Ⅰ、Ⅲ型膠原為基質、人成纖維細胞和制備好的微囊為種子細胞,用組織工程皮膚培養(yǎng)系統(tǒng)構建復合微囊的組織工程真皮,體外培養(yǎng)1周后行羥脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)測定,ELISA法測定其分泌功能,組織形態(tài)學觀察。以豬背部急性全層創(chuàng)面為模型,按移植物不同分為5組:NGF- NIH3T3微囊真皮組(A組)、NIH3T3微囊真皮組(B組)、空囊真皮組(C組)、NGF(5 ng/ml)+膠原膜組(D組)和空白對照組(E組),觀察創(chuàng)面再上皮化及愈合速度和愈合時間。 結果 轉NGF基因微囊復合組織工程真皮后體外培養(yǎng)6周,仍穩(wěn)定分泌NGF(124.32 pg/ml),體外培養(yǎng)1周后,組織工程真皮中NGF-NIH3T3微囊組Hyp含量為69.68±6.20 mg/g,較空白對照組增加約2倍以上。移植治療急性創(chuàng)面,A組平均愈合時間為25±2 d,B組為34±3 d,C組為34±2 d,D組為33±2 d,E組為40±3 d,A組創(chuàng)面愈合時間平均至少縮短約10 d,提高了創(chuàng)面愈合的速度。 結論 將分泌NGF微囊復合組織工程真皮后可提高組織工程真皮的質量,并促進急性創(chuàng)面的愈合。
引用本文: 胡昭華,陳紹宗,金巖,雄鷹,王為,馬小軍,宋玫. 微囊化基因修飾細胞復合組織工程真皮構建及其對創(chuàng)面愈合的影響. 中國修復重建外科雜志, 2005, 19(12): 1024-1028. doi: 復制