目的 構(gòu)建人骨形成蛋白-2（hBMP-2）真核表達(dá)載體pcDNA3.1-hBMP-2，轉(zhuǎn)染人骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)，探討基因轉(zhuǎn)染對其增殖和血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）表達(dá)的影響。方法 利用重組DNA和基因克隆技術(shù)構(gòu)建重組載體pcDNA3.1-hBMP-2；細(xì)胞培養(yǎng)和基因轉(zhuǎn)染技術(shù)體外轉(zhuǎn)染人MSCs；免疫細(xì)胞化學(xué)、原位雜交和蛋白印跡法檢測細(xì)胞BMP-2的表達(dá)；通過流式細(xì)胞儀和VEGF探針原位雜交分析其對細(xì)胞增殖和VEGF表達(dá)的影響。結(jié)果 轉(zhuǎn)染后細(xì)胞在mRNA水平和蛋白質(zhì)水平均表達(dá)BMP-2；轉(zhuǎn)染后S期細(xì)胞比例增多，提示細(xì)胞DNA的合成增加；BMP-2基因轉(zhuǎn)染上調(diào)細(xì)胞VEGF的表達(dá)。結(jié)論 在脂質(zhì)體介導(dǎo)下，pcDNA3.1-hBMP-2轉(zhuǎn)染MSCs獲得成功?；蜣D(zhuǎn)染后能促進(jìn)細(xì)胞增殖并將通過使VEGF的表達(dá)增加促進(jìn)血管再生，為進(jìn)一步骨缺損的基因治療及構(gòu)建組織工程骨奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

引用本文： 李建軍,王文軍,景元海,卜麗莎,楊紹娟,張文嵐,徐莘香. 重組pcDNA3.1-hBMP-2轉(zhuǎn)染人骨髓基質(zhì)干細(xì)胞和對其增殖及血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的影響. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2004, 18(2): 100-103. doi: 復(fù)制