目的　構(gòu)建人骨形成蛋白 - 2 (BMP- 2 )和骨保護素 (OPG)的共表達真核載體 ,研究其在小鼠成肌細胞C2 C12中的表達。　方法　以人骨肉瘤細胞系 MG6 3的總 RNA為模板 ,RT- PCR法獲得人 OPG的編碼區(qū) c DNA,克隆入真核表達載體 p IRES2 - EGFP的多克隆位點 ,再將人 BMP- 2的編碼區(qū) c DNA克隆入 p IRES2 - EGFP中的 Bst X 位點 ,構(gòu)建 BMP- 2和 OPG的雙順反子真核表達載體 p IRES2 - BMP- 2 - OPG,在陽離子脂質(zhì)體介導(dǎo)下轉(zhuǎn)染 C2 C12細胞 ,Western blot法檢測 BMP- 2和 OPG的表達?！〗Y(jié)果　 1獲得人 OPG編碼區(qū)全長 c DNA。 2構(gòu)建人 BMP- 2和 OPG的雙順反子真核表達載體 p IRES2 - BMP- 2 - OPG。 3經(jīng) Western blot檢測 ,p IRES2 - BMP- 2 - OPG轉(zhuǎn)染 C2 C12細胞后 ,細胞可穩(wěn)定表達 BMP- 2和 OPG。　結(jié)論　構(gòu)建了人 BMP- 2和 OPG的共表達真核載體 ,并可在C2C12細胞中穩(wěn)定表達,為應(yīng)用BMP-2和OPG進行骨質(zhì)疏松等疾病的治療研究奠定了基礎(chǔ)。

引用本文： 劉繼中,胡蘊玉,紀宗玲,陳蘇民,朱幫福,陶惠人. 人骨形成蛋白-2和骨保護素在小鼠成肌細胞中的共表達. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2003, 17(1): 1-4. doi: 復(fù)制