目的 探討穩(wěn)定表達人骨形成蛋白-2(hBMP-2)基因的成纖維細胞是否具有體內誘導成骨能力。方法 構建重組真核表達載體pcDNA3-hBMP-2,在脂質體介導下,將其導入NIH3T3細胞,通過G418篩選獲得陽性克隆,并繼續(xù)培養(yǎng)4周,用細胞原位雜交和免疫組織化學方法觀察hBMP-2基因在NIH3T3細胞內的穩(wěn)定表達,并觀察了穩(wěn)定表達hBMP-2的成纖維細胞堿性磷酸酶(ALP)活性的變化,將穩(wěn)定表達hBMP-2的成纖維細胞植入裸鼠肌袋內觀察其體內誘導成骨作用。結果 成功構建重組真核表達載體pcDNA3-hBMP-2,經細胞原位雜交和免疫組織化學證實,轉染pcDNA3-hBMP-2后的NIH3T3細胞內有大量hMP-2 mRNA的轉錄及其蛋白的穩(wěn)定表達,穩(wěn)定表達hBMP-2的成纖維細胞ALP活性顯著上升,植入裸鼠肌袋內4周有大量軟骨形成。結論 穩(wěn)定表達hBMP-2的成纖維細胞具有體內誘導成骨能力。
引用本文: 栗向東,胡蘊玉. 穩(wěn)定表達人骨形成蛋白-2基因的成纖維細胞體內誘導成骨作用. 中國修復重建外科雜志, 2003, 17(3): 177-179. doi: 復制
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