目的 探討穩(wěn)定表達人骨形成蛋白-2(hBMP-2)基因的成纖維細胞是否具有體內(nèi)誘導成骨能力。方法 構(gòu)建重組真核表達載體pcDNA3-hBMP-2，在脂質(zhì)體介導下，將其導入NIH3T3細胞，通過G418篩選獲得陽性克隆，并繼續(xù)培養(yǎng)4周，用細胞原位雜交和免疫組織化學方法觀察hBMP-2基因在NIH3T3細胞內(nèi)的穩(wěn)定表達，并觀察了穩(wěn)定表達hBMP-2的成纖維細胞堿性磷酸酶(ALP)活性的變化，將穩(wěn)定表達hBMP-2的成纖維細胞植入裸鼠肌袋內(nèi)觀察其體內(nèi)誘導成骨作用。結(jié)果 成功構(gòu)建重組真核表達載體pcDNA3-hBMP-2，經(jīng)細胞原位雜交和免疫組織化學證實，轉(zhuǎn)染pcDNA3-hBMP-2后的NIH3T3細胞內(nèi)有大量hMP-2 mRNA的轉(zhuǎn)錄及其蛋白的穩(wěn)定表達，穩(wěn)定表達hBMP-2的成纖維細胞ALP活性顯著上升，植入裸鼠肌袋內(nèi)4周有大量軟骨形成。結(jié)論 穩(wěn)定表達hBMP-2的成纖維細胞具有體內(nèi)誘導成骨能力。
引用本文： 栗向東,胡蘊玉. 穩(wěn)定表達人骨形成蛋白-2基因的成纖維細胞體內(nèi)誘導成骨作用. 中國修復重建外科雜志, 2003, 17(3): 177-179. doi: 復制