目的 觀察人玻璃體液體外培養(yǎng)誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)細胞間質(zhì)轉(zhuǎn)分化作用。 方法 將3~5代傳代人RPE細胞分為普通培養(yǎng)組和玻璃體液培養(yǎng)組,分別應(yīng)用普通培養(yǎng)液和25%玻璃體液進行培養(yǎng)。采用相差顯微鏡觀察兩組細胞形態(tài)變化,細胞爬片檢測肌動蛋白細胞骨架的變化。分別用細胞劃痕法、Transwell小室侵襲法及Ⅰ型膠原凝膠收縮實驗檢測細胞遷移、侵襲及收縮力的變化。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測 alpha;-平滑肌肌動蛋白( alpha;-SMA)和Snail1 mRNA的表達。 結(jié)果 相差顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn),普通培養(yǎng)組細胞保持扁平形態(tài),細胞接觸廣泛;玻璃體液培養(yǎng)組細胞一端呈扇形,另一端呈錐形拖尾形或梭形,細胞生長呈彼此分離的方式。細胞爬片結(jié)果顯示,普通培養(yǎng)組肌動蛋白骨架主要分布于RPE細胞周邊部,形如細胞周邊的條帶狀;玻璃體液培養(yǎng)組肌動蛋白纖維在細胞的一端重排,形成扇形扁平狀偽足突起,而在細胞另一端形成錐形拖尾改變。玻璃體液培養(yǎng)組與普通培養(yǎng)組比較,RPE遷移及侵襲能力顯著增強(t=14.190、22.630)、細胞收縮能力顯著下降(t=6.221),差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。RT-PCR檢測結(jié)果顯示,玻璃體液培養(yǎng)組與普通培養(yǎng)組比較,Snail1 mRNA表達顯著上升(t=3.218,P=0.032), alpha;-SMA mRNA表達顯著下降(t=3.990,P=0.016),差異均有統(tǒng)計學意義。 結(jié)論 玻璃體液培養(yǎng)可誘導(dǎo)RPE細胞間質(zhì)轉(zhuǎn)分化。這一作用通過增強RPE細胞遷移及侵襲能力,抑制RPE細胞收縮力;提高RPE細胞Snail1 mRNA表達,下調(diào) alpha;-SMA mRNA表達實現(xiàn)。
引用本文: 黃雄高,張少沖,魏雁濤,馬海智,張釗填,張婷. 玻璃體液誘導(dǎo)視網(wǎng)膜色素上皮細胞間質(zhì)轉(zhuǎn)分化作用. 中華眼底病雜志, 2013, 29(2): 166-170. doi: 復(fù)制