目的 觀察光照后人視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)細(xì)胞趨化因子受體3(CCR3)配體嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子(eotaxin)-1、eotaxin-2、eotaxin-3的表達(dá)。方法 體外培養(yǎng)人RPE細(xì)胞,取第5~10代生長(zhǎng)狀態(tài)良好的傳代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。將同代細(xì)胞隨機(jī)分為光照干預(yù)組與正常對(duì)照組。采用15 W藍(lán)色熒光燈自制光照器,以(600 plusmn;100) Lux的強(qiáng)度對(duì)光照干預(yù)組細(xì)胞持續(xù)光照12 h,對(duì)照組細(xì)胞采用雙層高壓消毒錫紙包裹。隨后兩組細(xì)胞均置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng),并于光照結(jié)束后0、3、6、12、24 h終止細(xì)胞培養(yǎng)。采用實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)和蛋白免疫印跡法分別檢測(cè)eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3 mRNA和蛋白的表達(dá)。結(jié)果 光照干預(yù)組細(xì)胞eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3 mRNA 和蛋白表達(dá)均隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)呈上升趨勢(shì),其中eotaxin-3 mRNA和蛋白表達(dá)增加最為明顯。光照干預(yù)組與正常對(duì)照組比較,光照結(jié)束后0(t1=6.05,t2=12.561)、3(t1=2.95,t2=3.67) h時(shí)eotaxin-1、eotaxin-2 mRNA表達(dá)間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),eotaxin-3 mRNA表達(dá)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t3=1.57、1.00,P>0.05);光照結(jié)束后6(t1=4.73,t2=18.64,t3=28.48)、12(t1=3.11,t2=20.62,t3=18.50)、24 (t1=8.25,t2=38.27,t3=18.60)h時(shí)eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3 mRNA表達(dá)間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。光照干預(yù)組與正常對(duì)照組比較,除光照結(jié)束后3 h時(shí)eotaxin-3 蛋白表達(dá)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外(t3=1.28,P>0.05);光照結(jié)束后0(t1=4.85,t2=5.45,t3=6.21)、3 h(t1=5.64,t2=4.55)、6(t1=31.60,t2=6.63,t3=7.15)、12(t1=14.09,t2=18.22,t3=15.76)、24(t1=6.96,t2=10.47,t3=12.85) h 時(shí)eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3 蛋白表達(dá)間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 光照后人RPE細(xì)胞CCR3配體eotaxin-1、eotaxin-2 、eotaxin-3 mRNA和蛋白表達(dá)均隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)呈上升趨勢(shì),以eotaxin-3表達(dá)增加最為突出。
引用本文: 李璐,陳長(zhǎng)征,易佐慧子,翁銘,邢怡橋. 光照對(duì)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞趨化因子受體3配體的影響. 中華眼底病雜志, 2013, 29(4): 416-420. doi: 復(fù)制