目的 探討褪黑素(MLT)對視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(RB)HXO-RB44細(xì)胞增生活性的影響及相關(guān)機(jī)制。方法 利用四氮唑化合物(MTT)比色法,觀察不同濃度的MLT對RB HXO-RB44細(xì)胞增生活性的影響;利用10-10、10-9、10-8、10-7 mmol/L的MLT對RB HXO-RB44分別進(jìn)行干預(yù),采用Hoechst熒光染色觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化;利用流式細(xì)胞儀測定不同濃度的MLT干預(yù)24 h后,RB HXO-RB44細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)的表達(dá)、細(xì)胞周期與凋亡情況。結(jié)果 濃度為10-7 mmol/L以下的MLT對HXO-RB44細(xì)胞并無抑制作用(P值均>0.05)。10-6 mmol/L以上的MLT能夠顯著抑制HXO-RB44細(xì)胞增生(P<0.01)。濃度為10-6、10-5、10-4 mmol/L的MLT干預(yù)后,隨藥物濃度的升高,HXO-RB44細(xì)胞內(nèi)ROS的表達(dá)逐漸升高。Hoechst染色顯示:不同濃度的褪黑素分別作用于培養(yǎng)的HXO-RB44細(xì)胞4、8、12、24 h后,細(xì)胞核固縮、核碎裂增多,細(xì)胞凋亡的程度隨著MLT濃度的增大而加重。流式細(xì)胞儀檢測:藥物干預(yù)后,G0/G1期細(xì)胞明顯增多,S期細(xì)胞減少,G2/M期細(xì)胞相對增多,隨著MLT濃度的升高,HXO-RB44細(xì)胞凋亡率明顯升高。結(jié)論 濃度大于10-6 mmol/L的MLT能夠有效地抑制HXO-RB44細(xì)胞增生,其抑制效率隨藥物濃度的升高和作用時(shí)間的延長而增強(qiáng);MLT的抗細(xì)胞增殖作用可能與其誘導(dǎo)HXO-RB44細(xì)胞內(nèi)的活性氧產(chǎn)生、阻滯細(xì)胞周期于G0/G1期并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡有關(guān)。
引用本文: 楊一濤 唐羅生 曾祥云 蔣怡平 袁思奇. 褪黑素對體外培養(yǎng)的視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤HXO-RB44細(xì)胞增生活性的影響察. 中華眼底病雜志, 2009, 25(2): 103-107. doi: 復(fù)制