目的 探討人重組表皮生長(zhǎng)因子（rhEGF）和?；撬狍w外誘導(dǎo)人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)條件和可能機(jī)制。方法 用含有105 U/L青霉素、100 mg/L鏈霉素、10%胎牛血清（FBS）、5%自體血漿、4 mmol/L谷氨酰胺、30 ng/ml rhEGF的Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基與F12以1∶1混合（DMEM/F-12）培養(yǎng)液對(duì)人臍血MSC進(jìn)行原代培養(yǎng)，傳至第3代后改用含牛磺酸的培養(yǎng)基進(jìn)行誘導(dǎo)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面抗原CD90、CD29、CD34、CD44及CD45的表達(dá)。免疫細(xì)胞化學(xué)方法觀察神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、視紫紅質(zhì)、巢蛋白的陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)情況。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用兩組資料的卡方檢驗(yàn)分析NSE、視察紅質(zhì)、巢蛋白的表達(dá)。結(jié)果 臍血MSC首次培養(yǎng)5～7 d，有間充質(zhì)樣細(xì)胞貼壁,3～4周后細(xì)胞達(dá)80%～90%融合,傳代后生長(zhǎng)加速；形態(tài)學(xué)類(lèi)似骨髓源性MSC。臍血MSC均一穩(wěn)定地表達(dá)MSC的相關(guān)抗原CD29、CD44、CD90，不表達(dá)CD34、CD45。經(jīng)?；撬狍w外誘導(dǎo)后的臍血MSC中，3120個(gè)細(xì)胞中有2515個(gè)細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE),3050個(gè)細(xì)胞中有903個(gè)細(xì)胞表達(dá)巢蛋白,3175個(gè)細(xì)胞中有1168個(gè)細(xì)胞表達(dá)視紫紅質(zhì)；未誘導(dǎo)組的2965個(gè)臍血MSC中僅有234個(gè)細(xì)胞表達(dá)NSE,其他抗原未見(jiàn)表達(dá)。兩組間NSE、巢蛋白和視紫紅質(zhì)的表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( chi;2=3 242.9,1 073.0,1 444.5；P值均＜0.01)。結(jié)論 人臍血MSC經(jīng)rhEGF和?；撬嵴T導(dǎo)后能使部分MSC向神經(jīng)元樣細(xì)胞或視紫紅質(zhì)陽(yáng)性細(xì)胞分化。
引用本文： 金瑋,邢怡橋,楊安懷,楊燕寧,艾明. 人重組表皮生長(zhǎng)因子和?；撬狍w外誘導(dǎo)人臍血干細(xì)胞分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞. 中華眼底病雜志, 2009, 25(4): 261-264. doi: 復(fù)制