目的 比較體外不同培養(yǎng)條件對視網膜及腦神經干細胞（NSCs)視紫紅質的純化能力及不同誘導條件對NSCs的誘導分化能力。方法 取胚兔視網膜及大腦皮質制備單細胞懸液，分別在5種不同培養(yǎng)基中進行體外培養(yǎng)并純化。選取無血清條件下傳3代的NSCs，分別在2種培養(yǎng)基中誘導8~10 d。采用免疫熒光法及流式細胞儀檢測所獲得細胞的神經干細胞和視網膜神經上皮細胞抗原的表達。結果 免疫熒光法顯示無血清培養(yǎng)條件下2種組織來源的NSCs均部分表達巢蛋白。流式細胞術顯示2種誘導方式均部分細胞表達巢蛋白，較誘導前明顯降低，而視紫紅質及Thy1.1的表達均較誘導前明顯增高。經5%胎牛血清(FBS)誘導的細胞表達視紫紅質較聯(lián)合應用全反式視黃酸(ATRA)時高,差異均有統(tǒng)計學意義( chi;2=30.59,6.76;P＜0.01)，但Thy1.1表達低于后者，差異也有統(tǒng)計學意義( chi;2=6.19,22.92;P=0.01)。結論 無血清培養(yǎng)基添加N2、EGF、bFGF、LIF 4種因子可以獲得最佳純化效果。2種誘導培養(yǎng)基都能夠誘導NSCs的分化，視網膜NSCs分化為視網膜神經上皮細胞的能力高于大腦皮質NSCs。
引用本文： 吳嬋,董方田,陳連鳳,許卓再. 體外培養(yǎng)及誘導胚兔視網膜及腦神經干細胞分化的研究. 中華眼底病雜志, 2009, 25(4): 265-269. doi: 復制
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