目的 探討人胰蛋白酶原激活肽(TAP)誘導(dǎo)大鼠胰腺腺泡細(xì)胞高遷移率族蛋白l(HMGB1)的分泌規(guī)律和丙酮酸乙酯(EP)對(duì)其釋放的影響。
方法 將12只SD大鼠處死后,取出胰腺分離胰腺腺泡細(xì)胞,將所得細(xì)胞懸液按抽簽法隨機(jī)分為3組,對(duì)照組、TAP組及EP組。TAP組及EP組加入相同劑量的TAP(終濃度3nmol/L),EP組同時(shí)加入EP(終濃度28mmol/L),在3、6、12及24h分別取細(xì)胞樣本。采用實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)HMGB1 mRNA的表達(dá),蛋白印跡法(Western blot)檢測(cè)HMGB1蛋白的表達(dá);并進(jìn)行HMGB1mRNA及蛋白的表達(dá)與TAP作用時(shí)間的Spearman秩相關(guān)分析。
結(jié)果 與對(duì)照組比較,TAP組及EP組的HMGB1mRNA及蛋白的表達(dá)均隨TAP作用時(shí)間的延長(zhǎng)而上調(diào)(P<0.05);與TAP組比較,EP組的HMGB1 mRNA及蛋白表達(dá)則下調(diào)(P<0.05)。TAP組組內(nèi)比較顯示, HMGB1mRNA及蛋白的表達(dá)隨TAP作用時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸升高(P<0.05),且以12h及24h時(shí)升高明顯(P<0.01),HMGB1mRNA及蛋白的表達(dá)與TAP作用時(shí)間呈正相關(guān)(rs=0.971,P<0.01; rs=0.966,P<0.01)。
結(jié)論 TAP可誘導(dǎo)大鼠胰腺腺泡細(xì)胞內(nèi)HMGB1的釋放。急性胰腺炎早期的TAP與晚期的HMGB1之間存在著時(shí)間的正向聯(lián)系。EP可抑制HMGB1的釋放。
引用本文: 王國(guó)良,兌丹華,白亮,劉堯,田飛,魏巍. TAP誘導(dǎo)大鼠胰腺腺泡細(xì)胞釋放HMGB1的研究△. 中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志, 2012, 19(10): 1074-1078. doi: 復(fù)制
1. | 黃莚庭. 急性胰腺炎細(xì)胞內(nèi)早期事件的再認(rèn)識(shí)[J]. 中華肝膽外科雜志, 2006, 12(2): 75-76. |
2. | 于秉治, 余承高, 陳棟梁, 等. 醫(yī)用生物化學(xué)[M]. 北京: 中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社, 2004: 55-57. |
3. | Hyvönen MT, Herzig KH, Sinervirta R, et al. Activated polyamine catabolism in acute pancreatitis: alpha-methylated polyamine analogues prevent trypsinogen activation and pancreatitis-associated mortality[J]. Am J Pathol, 2006, 168(1): 115-122. |
4. | Goodwin GH, Sanders C, Johns EW. A new group of chromatin-associated proteins with a high content of acidic and basic amino acdis[J]. Eur J Biochem, 1973, 38(1): 14-19. |
5. | 姚詠明, 盛志勇. 高遷移率族蛋白-1在膿毒癥發(fā)病中的作用與意義[J]. 解放軍醫(yī)學(xué)雜志, 2002 , 27(9): 753-756. |
6. | 欒正剛, 何忠野, 張成, 等. 丙酮酸乙酯對(duì)重癥急性胰腺炎大鼠腸黏膜HMGB1表達(dá)的影響[J]. 中國(guó)普通外科雜志, 2008, 17(3): 214-218. |
7. | 陳詩(shī)書, 孔良曼, 章有章, 等. 醫(yī)學(xué)生物化學(xué)[M]. 上海: 復(fù)旦大學(xué)出版社, 1999: 43-44. |
8. | 高軍, 張淑文, 李非. 胰蛋白酶原激活肽在大鼠實(shí)驗(yàn)性急性胰腺炎中的產(chǎn)生及意義[J]. 中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志, 2001,8(5): 301-306. |
9. | 張明威, 王欣, 張靜. 胰蛋白酶原激活肽與急性胰腺炎嚴(yán)重程度的相關(guān)性研究[J]. 臨床肝膽病雜志, 2007, 23(6): 448-449. |
10. | 朱峰, 龍錦, 何忠野, 等. 急性壞死性胰腺炎大鼠胰腺高遷移率族蛋白-1的表達(dá)及意義[J]. 中國(guó)普通外科雜志, 2007, 16(5): 418-421. |
11. | Andersson U, Wang H, Palmblad K, et al. High mobility group 1 protein (HMG-1) stimulates proinflammatory cytokine synthesis in human monocytes[J]. J Exp Med, 2000, 192(4): 565-570. |
12. | Rouhiainen A, Imai S, Rauvala H, et al. Occurrence of amphoterin (HMG1) as an endogenous protein of human platelets that is exported to the cell surface upon platelet activation[J]. Thromb Haemost, 2000, 84(6): 1087-1094. |
13. | 楊智勇, 王春友, 熊炯祈, 等. 重癥急性胰腺炎大鼠血清高遷徙率族蛋白-1水平的時(shí)相變化及意義[J]. 華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版), 2004, 33(4): 466-468. |
14. | 張喜平, 林謙. 急性胰腺炎時(shí)炎癥介質(zhì)與細(xì)胞凋亡關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 世界華人消化雜志, 2005, 13(23): 2773-2777. |
15. | Wang H, Yang H, Tracey KJ. Extracellular role of HMGB1 in inflammation and sepsis[J]. J Intern Med, 2004, 255(3): 320-331. |
- 1. 黃莚庭. 急性胰腺炎細(xì)胞內(nèi)早期事件的再認(rèn)識(shí)[J]. 中華肝膽外科雜志, 2006, 12(2): 75-76.
- 2. 于秉治, 余承高, 陳棟梁, 等. 醫(yī)用生物化學(xué)[M]. 北京: 中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社, 2004: 55-57.
- 3. Hyvönen MT, Herzig KH, Sinervirta R, et al. Activated polyamine catabolism in acute pancreatitis: alpha-methylated polyamine analogues prevent trypsinogen activation and pancreatitis-associated mortality[J]. Am J Pathol, 2006, 168(1): 115-122.
- 4. Goodwin GH, Sanders C, Johns EW. A new group of chromatin-associated proteins with a high content of acidic and basic amino acdis[J]. Eur J Biochem, 1973, 38(1): 14-19.
- 5. 姚詠明, 盛志勇. 高遷移率族蛋白-1在膿毒癥發(fā)病中的作用與意義[J]. 解放軍醫(yī)學(xué)雜志, 2002 , 27(9): 753-756.
- 6. 欒正剛, 何忠野, 張成, 等. 丙酮酸乙酯對(duì)重癥急性胰腺炎大鼠腸黏膜HMGB1表達(dá)的影響[J]. 中國(guó)普通外科雜志, 2008, 17(3): 214-218.
- 7. 陳詩(shī)書, 孔良曼, 章有章, 等. 醫(yī)學(xué)生物化學(xué)[M]. 上海: 復(fù)旦大學(xué)出版社, 1999: 43-44.
- 8. 高軍, 張淑文, 李非. 胰蛋白酶原激活肽在大鼠實(shí)驗(yàn)性急性胰腺炎中的產(chǎn)生及意義[J]. 中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志, 2001,8(5): 301-306.
- 9. 張明威, 王欣, 張靜. 胰蛋白酶原激活肽與急性胰腺炎嚴(yán)重程度的相關(guān)性研究[J]. 臨床肝膽病雜志, 2007, 23(6): 448-449.
- 10. 朱峰, 龍錦, 何忠野, 等. 急性壞死性胰腺炎大鼠胰腺高遷移率族蛋白-1的表達(dá)及意義[J]. 中國(guó)普通外科雜志, 2007, 16(5): 418-421.
- 11. Andersson U, Wang H, Palmblad K, et al. High mobility group 1 protein (HMG-1) stimulates proinflammatory cytokine synthesis in human monocytes[J]. J Exp Med, 2000, 192(4): 565-570.
- 12. Rouhiainen A, Imai S, Rauvala H, et al. Occurrence of amphoterin (HMG1) as an endogenous protein of human platelets that is exported to the cell surface upon platelet activation[J]. Thromb Haemost, 2000, 84(6): 1087-1094.
- 13. 楊智勇, 王春友, 熊炯祈, 等. 重癥急性胰腺炎大鼠血清高遷徙率族蛋白-1水平的時(shí)相變化及意義[J]. 華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版), 2004, 33(4): 466-468.
- 14. 張喜平, 林謙. 急性胰腺炎時(shí)炎癥介質(zhì)與細(xì)胞凋亡關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 世界華人消化雜志, 2005, 13(23): 2773-2777.
- 15. Wang H, Yang H, Tracey KJ. Extracellular role of HMGB1 in inflammation and sepsis[J]. J Intern Med, 2004, 255(3): 320-331.