【摘 要】 目的 改進(jìn)制備工藝，提高幾丁聚糖/ 甘油磷酸鈉水凝膠（chitosan/glycerol phosphate, C/GP）的黏度，以期拓展其應(yīng)用范圍。 方法 采用改進(jìn)的消毒方法，即將幾丁聚糖單獨(dú)進(jìn)行高壓蒸汽消毒，制備高黏度溫敏性C/GP（high viscous C/GP, HV-C/GP）。并采用常規(guī)方法制備C/GP。Gemini 流變儀動態(tài)檢測HV-C/GP、C/GP 流變學(xué)變化，評估黏度提高以后材料的初始黏度、膠凝溫度和膠凝時間變化。將凝膠化的兩種材料，放入PBS 液中，于0、1、2、5、10 和25 d取出，干燥稱重，計算失重率，比較兩種材料的體外降解情況。采用掃描電鏡觀察兩種材料的超微結(jié)構(gòu)。 結(jié)果 脫乙酰度91% 的C/GP 初始黏度為1.81 Pas，而HV-C/GP 為17.24 Pas，后者較前者提高了近10 倍。C/GP 的膠凝溫度為37℃，HV-C/GP 為34℃；在膠凝溫度下，兩者的膠凝時間約為5 min。0.5 mL HV-C/GP 和C/GP 凝膠化后第1 天，失重率分別約為72.5% 和55.4%，此后質(zhì)量逐漸降低，至第25 天分別為90.8% 和78.2%。掃描電鏡下兩種材料均可以觀察到多孔網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，C/GP 孔徑為50~100 μm，HV-C/GP 孔徑為30~50 μm，后者較前者明顯縮小。 結(jié)論 通過改進(jìn)消毒方法制備的HV-C/GP 黏度明顯提高，但溫敏性變化不大；降解時間有所延長；掃描電鏡觀察可見多孔網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)，且孔徑減小。
目的 將高黏度幾丁聚糖水凝膠（high viscous chitosan/glycerol phosphate，HV-C/GP）與異體脫鈣骨基質(zhì)（demineralized bone matrix，DBM）顆粒復(fù)合，評估修復(fù)兔膝全層軟骨缺損的效果。 方法 將HV-C/GP 與DBM按2 ∶ 1（W/W）復(fù)合，制備HV-C/GP-DBM 復(fù)合物。取成年健康34 周齡新西蘭大白兔24 只，體重3.5 ～ 4.5 kg，于兩側(cè)股骨髁間窩制備直徑為3.5 mm、深度為3 mm 的軟骨全層缺損區(qū)。右側(cè)缺損區(qū)植入HV-C/GP-DBM 復(fù)合物作為實驗組；左側(cè)不作處理，作為對照組。術(shù)后4、8、16 周，分別處死動物取材，行大體及組織學(xué)觀察。根據(jù)國際軟骨修復(fù)協(xié)會組織學(xué)評分（International Cartilage Repair Society Histological Scoring，ICRS）標(biāo)準(zhǔn)對第16 周標(biāo)本評分，評估軟骨修復(fù)效果。 結(jié)果 大體及組織學(xué)觀察：術(shù)后4、8 周，實驗組缺損區(qū)大部分被透明軟骨樣組織修復(fù)，DBM 顆粒部分吸收；對照組缺損區(qū)可見少量纖維組織及軟骨細(xì)胞；術(shù)后16 周，實驗組6 例關(guān)節(jié)表面平滑，缺損區(qū)已基本被透明軟骨樣軟骨組織修復(fù)，缺損區(qū)與周圍軟骨整合較好，新骨形成活躍，部分DBM 顆粒未被爬行替代；對照組仍存在凹陷，修復(fù)組織為纖維組織。術(shù)后16 周ICRS 評分結(jié)果示，實驗組的軟骨細(xì)胞生成以及與周圍軟骨整合等6 個方面均優(yōu)于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 HV-C/GP-DBM 復(fù)合物組織相容性好，可降解，可注射，是一種較好的軟骨修復(fù)材料。