采用堿性磷酸酶-抗堿性磷酸酶橋聯(lián)酶標法、乳酸脫氫酶釋放法和放射免疫法檢測了31例胃癌患者和30例正常對照者手術(shù)前后前列腺素E2(PGE2)、T淋巴細胞亞群及自然殺傷細胞活性(NKCA)的動態(tài)變化。結(jié)果：①胃癌患者術(shù)前CD+4/CD+8比值較正常對照組明顯降低，而PGE2明顯高于正常對照組，PGE2與CD+4/CD+8比值及NKCA呈負相關(guān)關(guān)系；②腫瘤組織中PGE2含量高于正常組織，切除腫瘤后外周血PGE2下降，NKCA及CD+4/CD+8比值逐漸增高。結(jié)果提示：胃癌患者術(shù)前細胞免疫功能顯著低下，處于免疫抑制狀態(tài)。腫瘤組織是異常增高的PGE2的主要來源，切除腫瘤后細胞免疫功能可逐漸恢復(fù)到正常水平。因此，手術(shù)前后連續(xù)檢測PGE2和細胞免疫功能，可評價手術(shù)療效及監(jiān)測腫瘤復(fù)發(fā)狀況。
【摘 要】 目的 肌腱損傷后周圍前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）及體外牽伸載荷條件下肌腱細胞產(chǎn)生的PGE2均升高，通過觀察外源性PGE2對兔跟腱膠原含量的影響，探討其與肌腱病發(fā)生的關(guān)系。 方法 取健康3～4月齡日本短耳兔24只，體重2.0～2.5 kg，雌雄不限；根據(jù)PGE2注射劑量不同隨機分為兩組（n=12）：低劑量組（50 ng）和高劑量組（500 ng）。隨機選擇一側(cè)后肢跟腱中部經(jīng)皮注射0.2 mL對應(yīng)劑量PGE2，對側(cè)對應(yīng)部位注射0.2 mL生理鹽水作為對照，每周注射1次至處死。注射4、8周后兩組各處死6只實驗動物，大體觀察跟腱情況后，取雙側(cè)跟腱HE染色觀察細胞結(jié)構(gòu)、基質(zhì)形態(tài)，苦味酸-天狼星紅染色偏振光顯微鏡下觀察肌腱組織的膠原變化并定量分析Ⅰ、Ⅲ型膠原含量，透射電鏡觀測膠原纖維密度及直徑。 結(jié)果 HE染色示兩組實驗側(cè)均出現(xiàn)膠原纖維結(jié)構(gòu)破壞?？辔端?天狼星紅染色示4、8周時兩組實驗側(cè)Ⅲ型膠原纖維均較對照側(cè)增加，Ⅰ型膠原減少（P lt; 0.05）；與低劑量組比較，高劑量組實驗側(cè)Ⅲ型膠原纖維增加，Ⅰ型膠原減少，Ⅲ/Ⅰ型膠原比值增高（P lt; 0.05）。透射電鏡示兩組4、8周時實驗側(cè)單位面積內(nèi)總膠原纖維橫截面積所占百分比均較對照側(cè)降低，直徑gt; 100 nm的纖維比例均較對照側(cè)降低，直徑lt; 100 nm的纖維比例均增加（P lt; 0.05）；與低劑量組比較，高劑量組實驗側(cè)單位面積內(nèi)總膠原纖維橫截面積所占百分比更低，直徑gt; 100 nm的纖維比例均明顯降低，直徑lt; 100 nm的比例明顯增加（P lt; 0.05）。 結(jié)論 重復(fù)注射PGE2能導(dǎo)致兔跟腱Ⅰ型膠原減少，Ⅲ型膠原增多，Ⅰ/Ⅲ型膠原比例倒置，單位面積總膠原纖維密度降低，直徑變細，可能與肌腱病發(fā)生相關(guān)。
目的 骨再生過程包含一系列復(fù)雜的分子信號途徑，通過探討NF-κB 作為骨折愈合過程中“關(guān)鍵性激活點”的可能性，為基因治療骨折延遲愈合和骨不連提供實驗依據(jù)。 方法 取6 ～ 7 周齡Wistar 雄性大鼠33 只，體重180 ～ 220 g，隨機分為4 組。對照組（A 組，n=3）、單純NF-κB 抑制劑Bay 11-7082 處理組（B 組，n=6）：分別在大鼠右前肢橈骨中下段經(jīng)皮注射0.3 mL 生理鹽水或含50 μmol/L Bay 11-7082 的生理鹽水，每天1 次，持續(xù)至處死。單純骨折組（C 組，n=12）、Bay 11-7082 干預(yù)骨折組（D 組，n=12）：制備右側(cè)橈骨中下段骨折模型后，C 組不作任何處理，D 組處理方法同B 組。觀察大鼠一般情況，A 組于注射后7 d，B、C、D 組于注射后3、7 d 取標本行ALP 活性、前列腺素E2（prostaglandins E2，PGE2）含量檢測以及Western blot 檢測NF-κB p65、BMP-7 和DNA 結(jié)合抑制因子2（inhibitor of DNA binding 2，Id2），并取C、D 組14、28 d 標本行HE 染色觀察。 結(jié)果 各組大鼠均存活至實驗完成。注射后3、7 d B組ALP 活性及PGE2 含量與A 組比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）；C 組較A 組增高，D 組較A 組降低，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.01）。注射后3、7 d，各組骨折端組織中均見NF-κB p65、BMP-7、Id2 表達，B 組各因子表達水平與A 組比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）；C 組NF-κB p65 和BMP-7 蛋白表達水平較A 組增高，Id2 蛋白表達水平較A 組降低，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.01）；D 組NF-κB p65、BMP-7 蛋白表達水平較A 組降低，Id2 蛋白表達較A 組增高，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.01）。組織學觀察示，注射后14、28 d C 組骨折端組織見大量骨性骨痂，而D 組28 d 時才見骨性骨痂。 結(jié) 論 NF- κB p65 可通過調(diào)控PGE2 分泌以及BMP-7 和Id2 蛋白表達促進大鼠橈骨骨折的早期愈合。
目的：探討在不同年齡SD大鼠右心房注射前列腺素E2（PGE2）對呼吸的影響。方法：7～9 d和21～23 d大鼠在迷走神經(jīng)完整和迷走神經(jīng)切斷的情況下從右心房注射PGE-2，觀察呼吸指標的變化。結(jié)果：①右心房注射PGE2在7～9 d和21～23 d大鼠中均引起呼吸暫停，呼氣延長時間分別為基礎(chǔ)呼氣時間的9.5和7.5倍（Plt;0.05）；②切斷迷走神經(jīng)后，右心房注射PGE-2在7～9 d和21～23 d大鼠均不再產(chǎn)生呼吸暫停，僅出現(xiàn)輕微呼吸抑制。結(jié)論：右心房注射PGE2在7～9 d和21～23 d大鼠均產(chǎn)生呼吸暫停，且依賴于迷走神經(jīng)的完整性。
目的 探究薯蕷皂苷（dioscin，Dio）對哮喘小鼠氣道炎癥的作用及microRNA-155（miR-155）/環(huán)氧合酶2（cyclooxygenase 2，COX-2）/前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）通路在其中的變化。方法 70只小鼠隨機分為對照（control）組、模型組、抑制劑（inhibitor）陰性對照組（inhibitor-NC組）、miR-155 inhibitor組、Dio組、Dio+miR-155模擬物（mimic）陰性對照組（Dio+mimic-NC組）、Dio+miR-155 mimic組，每組10只。采用屋塵螨誘導(dǎo)制備哮喘小鼠模型；酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測小鼠支氣管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中PGE2、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor α，TNF-α）、半胱氨酰白三烯（cysteinyl leukotriene 1，CysLTs）、半胱氨酰白三烯受體1（cysteinyl leukotriene receptor 1，CysLTR1）和白細胞介素（interleukin，IL）-4、IL-5、IL-13水平；蘇木精–伊紅和高碘酸希夫染色觀察氣道周圍炎癥細胞的浸潤情況及杯狀細胞分泌黏液的情況；實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測小鼠肺組織miR-155、COX-2 mRNA的表達水平；蛋白印跡法檢測小鼠肺組織COX-2蛋白表達。結(jié)果 miR-155 inhibitor和Dio能降低哮喘小鼠BALF中PGE2、TNF-α、CysLTs、CysLTR1和IL-4、IL-5、IL-13水平，減輕肺組織炎癥細胞浸潤和杯狀細胞黏液分泌情況，并降低肺組織miR-155、COX-2的mRNA和蛋白表達；而miR-155 mimic能明顯削弱Dio的抗哮喘作用。結(jié)論 Dio的抗哮喘作用可能與抑制miR-155/COX-2/PGE2途徑，進而減輕哮喘小鼠氣道炎癥有關(guān)。
目的 探討骨髓間充質(zhì)干細胞（bone marrow mesenchymal stem cell，BMSC）對脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)中肺泡巨噬細胞相關(guān)炎癥通路的作用及可能機制。方法 采用慢病毒轉(zhuǎn)染ptges及ptges shRNA至BMSC，建立穩(wěn)定的ptges過表達BMSC細胞株［BMSC-PGE2（+）］及ptges沉默的BMSC細胞株［BMSC-PGE2（–）］。將巨噬細胞分為對照組、LPS組、LPS+BMSC組、LPS+BMSC-PGE2（+）組、LPS+BMSC-PGE2（–）組，收集各組細胞，Western blot檢測核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體3（nucleotide-bound oligomerized domain-like receptor 3，NLRP3）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1前體（precursor cysteinyl aspartate specific proteinase 1，pro-Caspase-1）、Caspase-1及白細胞介素1β前體（precursor interleukin-1β，pro-IL-1β）蛋白表達水平；RT-PCR測定NLRP3、Caspase-1 mRNA表達水平；ELISA檢測細胞上清液中腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、IL-1β、IL-10、IL-18及前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）的表達水平。結(jié)果 LPS的干預(yù)顯著升高了巨噬細胞內(nèi)NLRP3、pro-Caspase-1、Caspase-1和pro-IL-1β的表達，與BMSC共培養(yǎng)后，各蛋白表達量明顯減少。加入PGE2過表達后，蛋白表達差異進一步下降。LPS組NLRP3、Caspase-1 mRNA表達量明顯升高，與BMSC共培養(yǎng)后表達顯著降低，PGE2過表達可以加大這種差異，而PGE2沉默組無明顯變化。ELISA結(jié)果顯示細胞上清液中TNF-α、IL-1β及IL-18含量在LPS組中最高，加入BMSC及過表達PGE2后可使得相關(guān)炎癥因子下降。LPS組IL-10和PGE2水平較對照組有升高趨勢，在LPS+BMSC組和LPS+BMSC-PGE2（+）組中水平進一步升高且有顯著差異。結(jié)論 當LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)發(fā)生時，BMSC能夠顯著減輕巨噬細胞中的炎癥反應(yīng)，這一過程可能是通過過表達PGE2從而抑制NLRP3介導(dǎo)的細胞焦亡通路來實現(xiàn)的。