目的 甲潑尼龍（methylprednisolone，MP）是治療急性脊髓損傷（spinal cord injury，SCI）的惟一有效藥物，但其作用機(jī)制尚未明確。通過觀察MP 對(duì)SCI 早期基因表達(dá)譜的影響，從基因表達(dá)層面探討其機(jī)制。 方法 采用重復(fù)樣本和重復(fù)基因芯片檢測(cè)的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。取9 只健康成年日本大耳白兔，體重（3 100 ± 140） g，隨機(jī)分為對(duì)照組（A 組）、模型組（B 組）和藥物組（C 組），每組3 只。A 組僅進(jìn)行椎板切除術(shù)，B、C 組行椎板切除后采用Allen 法建立急性SCI 模型。C 組在造模后2 h 按人- 兔等效劑量給予大劑量MP 沖擊治療，B 組注射等量生理鹽水，A 組不作處理。造模后8 h 處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，分別獲取以損傷區(qū)為中心長(zhǎng)約8 mm 的脊髓組織，采用Trizol 法提取總RNA，用9 張Agilent 兔脊髓組織全基因4 × 44 K 芯片進(jìn)行檢測(cè)。采用GeneSpring11.0 統(tǒng)計(jì)軟件，以P lt; 0.05 且倍數(shù)變化（fold change，F(xiàn)C）≥ 2 篩選出差異表達(dá)基因，并對(duì)部分差異表達(dá)基因行RT-PCR 驗(yàn)證。 結(jié)果 成功建立SCI 動(dòng)物模型并獲得相應(yīng)的組織標(biāo)本。各組總RNA質(zhì)量均能滿足基因芯片檢測(cè)要求?；蛐酒Y(jié)果顯示：在SCI 早期大劑量MP 治療后許多基因發(fā)生表達(dá)變化，主要涉及炎癥、先天性免疫、離子通道、物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和轉(zhuǎn)錄因子等，IL-1α、IL-1β 和防御素（defensin 4，NP-4）的RT-PCR 檢測(cè)結(jié)果與基因芯片結(jié)果相符。其中，先天性免疫相關(guān)基因如NP-3、NP-4、皮質(zhì)素6、內(nèi)源性抗菌肽CAP-18、抗菌肽等呈現(xiàn)顯著的差異性表達(dá)。 結(jié)論 大劑量MP 可能主要通過免疫調(diào)節(jié)機(jī)制發(fā)揮神經(jīng)功能保護(hù)作用，其主效應(yīng)細(xì)胞可能是中性粒細(xì)胞
目前, 所有的常規(guī)抗生素都出現(xiàn)了相應(yīng)的抗藥性致病菌株, 病原菌的抗藥性問題已經(jīng)日益嚴(yán)重地威脅著人們的健康。開發(fā)全新類型的抗生素是解決抗藥性問題的一條有效途徑。抗菌肽具有廣譜抗菌性、抗菌活性高、種類多等優(yōu)點(diǎn), 成為傳統(tǒng)抗生素的理想替代藥物。抗菌肽的來源非常廣泛, 如植物、動(dòng)物、微生物等; 不同抗菌肽的作用機(jī)制及其研究方法也有顯著的差異。本文就抗菌肽的制備、抗菌機(jī)制和研究抗菌機(jī)制的方法做一概述。
目的探討通過構(gòu)建材料表面微納結(jié)構(gòu)聯(lián)合涂覆抗菌肽提升鈦金屬抗菌性能的可行性。方法取鈦片進(jìn)行噴砂酸蝕（sandblasted large-grit acid-etched，SLA）及堿熱處理（alkali-heat treatment，AHT），構(gòu)建微納結(jié)構(gòu)；然后表面旋涂 10、30、50、70、90 μg 抗菌肽聚合物。掃描電鏡觀察處理前后鈦片表面形貌，能譜儀分析表面 C、N、O、Ti 4 種元素含量比例。將表面載有不同量抗菌肽聚合物的鈦片與金黃色葡萄球菌液共培養(yǎng)，24 h 后觀察抑菌圈形成情況，并測(cè)量抑菌圈直徑。另將處理前、SLA 處理、SLA+ AHT 處理、載有 90 μg 抗菌肽聚合物的鈦片分別與金黃色葡萄球菌以及大腸桿菌共培養(yǎng)，3 h 后掃描電鏡觀察兩種細(xì)菌在材料表面的黏附情況，3、6、9、12、24 h 測(cè)量菌液吸光度（A）值，評(píng)價(jià)鈦片抗菌效果。結(jié)果掃描電鏡下觀察，SLA+AHT 處理鈦片表面構(gòu)建包含微米及納米級(jí)孔洞的多級(jí)結(jié)構(gòu)；旋涂抗菌肽聚合物后表面孔徑<200 nm 的孔洞幾乎已被覆蓋。元素分析顯示，隨著抗菌肽聚合物旋涂量的增加，C 元素含量不斷增加；但直至含量達(dá) 70 μg 時(shí)才檢測(cè)到 N 元素。培養(yǎng) 24 h 后，載有不同量抗菌肽聚合物鈦片周圍均出現(xiàn)明顯抑菌圈，其中 90 μg 鈦片大于其余鈦片，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）?？咕鷮?shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，載抗菌肽聚合物的鈦片表面細(xì)菌黏附量較其余鈦片明顯減少，菌液A 值明顯降低，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論通過在材料表面制備微納結(jié)構(gòu)并涂覆抗菌肽，可賦予鈦金屬表面優(yōu)良的抗菌性能。
抗菌肽是一類廣泛存在于自然界，具有廣譜抗菌活性的多肽類物質(zhì)，因其獨(dú)特的抗菌作用機(jī)制被視為傳統(tǒng)抗生素的新型替代藥物。由于天然抗菌肽往往存在活性不強(qiáng)、代謝不穩(wěn)定等缺點(diǎn)，導(dǎo)致其開發(fā)與應(yīng)用受到很多限制，因此基于天然抗菌肽的設(shè)計(jì)與優(yōu)化成為了近期研究熱點(diǎn)。本文主要針對(duì)核糖體抗菌肽展開，總結(jié)其相關(guān)的一些衍生肽的設(shè)計(jì)和優(yōu)化策略，包括合理的一級(jí)結(jié)構(gòu)改造、環(huán)化策略、計(jì)算機(jī)輔助策略等，通過分析總結(jié)，期望對(duì)抗菌肽設(shè)計(jì)以及抗感染藥物的研發(fā)提供思路。