華西醫(yī)學期刊出版社
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  • 構建帶內支撐組織工程睪丸假體的實驗研究

    目的 探討以醫(yī)用多孔高密度聚乙烯(high-density polyethylene,HDPE,商品名為Medpor)為內支撐,外裹聚羥基乙酸(polyglycolic acid,PGA)的支架,接種軟骨細胞后,于裸鼠體內構建組織工程睪丸假體的可行性及特點。方法 取新生雌性長楓雜交仔豬1只,取四肢大關節(jié)表面軟骨,制備密度為5×107/ml的軟骨細胞懸液。將其接種于長短半徑分別為6mm和4mm的Medpor,外裹2mm PGA的支架,體外培養(yǎng)2周。取4周齡BALB/C裸鼠10只,隨機分為兩組(n=5) 。實驗組:采用制備的細胞支架復合物植入裸鼠背部皮下;對照組:采用Medpor-PGA復合支架植入裸鼠皮下。8周后處死裸鼠取材,行大體觀察、組織學及免疫組織化學觀察。結果 大體觀察:實驗組標本形狀與體積未發(fā)生變化,色澤及彈性與正常軟骨相似,軟骨與Medpor接合緊密;對照組無軟骨形成,外包裹纖維樣組織。實驗組:HE染色見軟骨內存在大量成熟的軟骨陷窩,無血管長入,部分PGA尚未降解完全;甲苯胺藍染色示細胞外基質具有異染特性;藏紅花染色示基質中大量蛋白聚糖沉積;Ⅱ型膠原免疫組織化學染色呈強陽性表達。對照組:Medpor被大量富含血管的纖維組織包裹。結論 利用Medpor與PGA復合的支架,接種軟骨細胞后,可于體內構建出具有預構睪丸形態(tài)且組織學良好的Medpor-軟骨復合體。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:20 導出 下載 收藏 掃碼
  • 肌肉游離移植后MAFbx 表達及肌肉功能實驗研究

    目的 觀察肌肉游離移植后泛素連接酶(MAFbx)mRNA 和蛋白表達的變化,以及肌肉萎縮和肌肉功能的動態(tài)恢復情況,并探討三者之間的關系。 方法 雌性SPF 級SD 大鼠36 只,體重(250 ± 25)g。隨機選取一側行股薄肌原位游離移植手術,作為實驗側;另一側不行手術作為對照側。術后觀察大鼠一般情況,于術后1、2、4、10、15 和30周,分別取6 只大鼠測量實驗側和對照側股薄肌肌肉收縮能力、肌濕重維持率,HE 染色觀察肌纖維橫截面積,實時定量PCR 檢測MAFbx/Atrogin-1 mRNA 相對表達量,Western blot 檢測MAFbx 蛋白表達。 結果 36 只大鼠全部成活,切口愈合好,實驗側肢體功能無障礙。實驗側肌纖維橫截面積、肌肉濕重維持率、肌肉最大單收縮力維持率和肌肉強直收縮力維持率均呈先降低(術后1 ~ 4 周)后增加(術后4 ~ 30 周)的趨勢。MAFbx mRNA 相對表達量術后2 周最高,為對照側7 倍;術后15 ~ 30 周逐漸下降,為對照側1.1 ~ 1.5 倍;各時間點實驗側與對照側比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05)。Western blot 檢測結果顯示術后1 ~ 15 周,實驗側肌肉內MAFbx 蛋白相對表達量與對照側相比,差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05);術后30 周差異無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05)。肌濕重維持率、肌纖維橫截面積恢復率分別與最大單收縮力維持率和最大強直收縮力維持率的相關系數(shù)為0.95、0.75 和0.93、0.68(P lt; 0.05)。MAFbx mRNA 及蛋白相對表達量分別與肌肉濕重維持率、肌纖維橫截面積恢復率、最大單收縮力維持率、最大強直收縮力維持率的相關系數(shù)為— 0.62(P lt; 0.05)、— 0.45(P gt; 0.05)、— 0.72(P lt; 0.05)、— 0.78(P lt; 0.05)和— 0.95(P lt; 0.05)、— 0.82(P lt; 0.05)、— 0.89(P lt; 0.05)、— 0.54(P gt; 0.05)。 結論 移植肌肉功能降低與肌肉萎縮密切相關。MAFbx mRNA 和蛋白表達增高,尤其在獲得神經(jīng)支配后4 ~ 15周仍持續(xù)升高,可能是肌肉萎縮引起肌肉功能降低的一個聯(lián)系點。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:07 導出 下載 收藏 掃碼
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