華西醫(yī)學期刊出版社
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找到 作者 包含"李逸松" 1條結果
  • 體外血管內皮細胞和脂肪干細胞聯(lián)合培養(yǎng)對脂肪干細胞成骨分化的影響

    目的 進一步研究血管內皮細胞(vascular endothelial cells,VECs)和脂肪干細胞(adipose-derived stromal cells,ADSCs)聯(lián)合培養(yǎng)對ADSCs 成骨分化的影響,為聯(lián)合培養(yǎng)VECs 和ADSCs 作為骨組織工程種子細胞的可能性提供實驗依據。 方法 分別自足月妊娠SD 大鼠和18 周齡SD 大鼠制備臍血來源的VECs 和ADSCs,行形態(tài)學觀察及免疫熒光染色鑒定。取第3 代ADSCs 與誘導培養(yǎng)6 周的VECs 按細胞比例分別為3 ∶ 1、1 ∶ 1 和1 ∶ 3 設為實驗組A、B、C 組,ADSCs、VECs 單獨培養(yǎng)設為對照組D、E 組。培養(yǎng)第7、14 天取各組細胞行ALP 和飽和茜素紅鈣染色,進行ALP 和骨鈣定性檢測;第4、7、14 天定量測定各組細胞ALP 和骨鈣素(osteocalcin,OC)含量。 結果 誘導培養(yǎng)6 周的臍血來源VECs 可見短梭形和多角形細胞混合生長,免疫熒光染色可見血管性血友病因子為陽性。ADSCs 培養(yǎng)可見貼壁單個核細胞形態(tài)單一,呈梭形生長,無重疊現象;免疫熒光染色可見CD90+。各組細胞培養(yǎng)第7 天,ALP 染色示A、D、E 組呈陰性反應,B、C 組可見部分陽性細胞;第14 天時D、E 組仍呈陰性反應,A、B、C 組可見片狀陽性細胞。培養(yǎng)第7 天,茜素紅染色示各組均未發(fā)現紅色陽性細胞;第14 天時A、B、C 組可見極少數陽性細胞,D、E 組未發(fā)現陽性細胞。各組ALP 含量隨時間延長均逐漸增高,其中B 組各時間點含量均最高,與其余各組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.01),各時間點A、C 組與D、E 組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.01),A、C 組間及D、E 組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05)。各組OC 含量隨時間延長逐漸增高,培養(yǎng)第7、14 天時B 組含量最高,各時間點B 組與其余各組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.01),第4、14 天時C、D 組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.01),第14 天時A、C 組和E 組比較差異有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05),其余各時間點各組間比較差異均無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05)。 結論 大鼠臍血來源的VECs 能在體外誘導ADSCs 向成骨細胞方向分化,1 ∶ 1 比例分化能力最強。

    發(fā)表時間:2016-08-31 05:47 導出 下載 收藏 掃碼
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