目的通過體外實(shí)驗(yàn),利用正交設(shè)計(jì)方法,探討微泡強(qiáng)化聲溶栓的主要影響因素,并確定微泡強(qiáng)化聲溶栓體外實(shí)驗(yàn)的優(yōu)選條件。 方法取50只SD雌性大鼠外周血制備標(biāo)準(zhǔn)血漿后,以100 μL標(biāo)準(zhǔn)血漿與25 μL凝血酶(0.15 U/ μL)混勻,置于37℃恒溫水浴箱分別孵育3、6、12、24 h,制備相應(yīng)栓齡血栓;建立體外溶栓模型。確定4個(gè)物理參數(shù):超聲輸出能量(因素A:5%、25%、50%、100%),微泡量(因素B:50、100、200、400 μL);尿激酶濃度(因素C:100、200、400、800 U/mL);超聲處理溶栓時(shí)間(因素D:10、20、30、40 min),進(jìn)行四因素四水平正交實(shí)驗(yàn),建立L16(45)正交表。低頻診斷超聲頻率為1.82 MHz,進(jìn)行體外溶栓實(shí)驗(yàn)。組織學(xué)及掃描電鏡觀察溶栓前后血栓結(jié)構(gòu)。溶栓前后進(jìn)行血栓稱重,計(jì)算溶栓率,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果組織學(xué)及掃描電鏡觀察各栓齡血栓溶栓后,血栓纖維網(wǎng)架被破壞。體外條件下最優(yōu)溶栓條件組合為C4-D4-A1-B4,即:尿激酶濃度800 U/mL、溶栓時(shí)間40 min、超聲輸出能量5%、微泡量400 μL。4個(gè)物理參數(shù)對各栓齡血栓溶栓效果均有顯著影響(P lt; 0.05),其中尿激酶濃度對溶栓率影響最顯著。血栓栓齡顯著影響溶栓效果,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。 結(jié)論微泡強(qiáng)化聲溶栓效果可靠,尿激酶起主導(dǎo)溶栓作用。低超聲輸出能量、高造影劑微泡量、長超聲輻照時(shí)間以及短栓齡有助于溶栓效果的提高。