【摘要】目的報道一種用雙功能螯合劑BAT與鼠單克隆抗體Fab’片段行點特異性交聯(lián)的新方法。方法通過位于Fab’鉸鏈區(qū)、遠(yuǎn)離抗原結(jié)合位點的活性巰基(-SH)直接與BAT相交聯(lián)。用簡單的兩步法制備B43單抗的Fab’片段。首先單抗用胃蛋白酶處理, 產(chǎn)生穩(wěn)定的F(ab’)2 片段,然后 F(ab’)2經(jīng)半胱氨酸還原后產(chǎn)生Fab’片段,最后Fab’片段直接與BAT交聯(lián)。結(jié)果每個Fab’分子平均含1.8個-SH基團(tuán), 74%的Fab’片段可與BAT生成交聯(lián)物,平均每個Fab’分子攜帶1.28個BAT。經(jīng)檢測,F(xiàn)(ab’)2、Fab’ 及 Fab’-BAT 均保持著良好的免疫活性。結(jié)論該交聯(lián)法簡單、高效,為雙功能螯合劑BAT與鼠單抗Fab’片段的交聯(lián)提供了一個新途徑。