目的 探討兔橈骨缺損采用同種異體骨及自體骨移植修復(fù)后 VEGF 及微血管密度（microvessel density，MVD）的表達(dá)及意義。? 方法 健康成年新西蘭大白兔 40 只，其中 12 只作為同種異體骨供體，另 28 只作為實驗受體。按美國組織庫標(biāo)準(zhǔn)制備同種異體骨。取受體實驗動物，制備雙側(cè)橈骨中段 10 mm 骨缺損模型。右側(cè)橈骨骨缺損內(nèi)植入自體髂骨骨粒（對照組）；左側(cè)取等量同種異體骨粒同法植入（實驗組）。于術(shù)后 2、4、8、12 周，采用免疫組織化學(xué)方法檢測骨缺損修復(fù)組織內(nèi) VEGF、CD34 蛋白的表達(dá)，并對 CD34 表達(dá)陽性血管進(jìn)行 MVD 計數(shù)。術(shù)后 12 周，對不脫鈣組織切片行 von Kossa 染色，行骨形態(tài)計量學(xué)參數(shù) [ 骨小梁相對體積（percent trabecular area，BV/TV）、骨小梁厚度（trabecular thickness，Tb.Th）、骨小梁數(shù)量（trabecular number，Tb.N）、骨小梁分離度（trabecular separation，Tb.Sp）] 檢測，并對 VEGF蛋白表達(dá)與骨形態(tài)計量學(xué)參數(shù)、 MVD 計數(shù)的相關(guān)性進(jìn)行分析。? 結(jié)果 VEGF 蛋白陽性物質(zhì)主要定位于血管內(nèi)皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、部分破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞。術(shù)后 2 周，實驗組及對照組 VEGF 蛋白表達(dá)灰度值比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）；術(shù)后 4、8 周，對照組 VEGF 蛋白表達(dá)優(yōu)于實驗組（P lt; 0.05）；而術(shù)后 12 周，兩組 VEGF 蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）。術(shù)后 2、4、8、12 周，兩組 VEGF 蛋白表達(dá)與 MVD 之間均成正相關(guān)（P lt; 0.01）。術(shù)后 12 周，骨形態(tài)計量學(xué)參數(shù) BV/TV、Tb.N、Tb.Th、Tb.Sp 組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05），而 VEGF 蛋白與 BV/TV、Tb.N、Tb.Th 成正相關(guān)，與 Tb.Sp 成負(fù)相關(guān)（P lt; 0.01）。? 結(jié)論 VEGF 在骨缺損愈合不同時期、不同部位表達(dá)各異，可協(xié)調(diào)軟骨及骨形成并與其血運(yùn)重建關(guān)系密切； VEGF 可能對同種異體骨移植修復(fù)骨缺損起促進(jìn)作用。
目的 探討大鼠BMSCs 來源的成骨細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞復(fù)合異體凍干顆粒骨的黏附性，為構(gòu)建血管化組織工程骨奠定實驗基礎(chǔ)。 方法 取4 周齡SD 大鼠，雌雄不限，體重100 ～ 110 g，分離培養(yǎng)BMSCs，取生長狀態(tài)良好的第3 代BMSCs 行成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)及成血管內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)并鑒定。將誘導(dǎo)7 d 的兩種細(xì)胞按1 ∶ 1 比例混合培養(yǎng)，作為實驗組；以生長狀態(tài)良好未誘導(dǎo)的第2 代BMSCs 作為對照組。培養(yǎng)后1 ～ 8 d 采用 MTT 法測定細(xì)胞增殖并繪制生長曲線。取誘導(dǎo)14 d 的兩種細(xì)胞分別按0.25 × 106、0.50 × 106、1.00 × 106、2.00 × 106、4.00 × 106 個/mL 接種于20% Col Ⅰ修飾前后的異體凍干顆粒骨（修飾組與未修飾組），接種后24 h 計算細(xì)胞黏附率。將誘導(dǎo)14 d 的兩種細(xì)胞按1 ∶ 1 比例混合，以總細(xì)胞密度2 × 106 個/mL 接種于修飾后異體凍干顆粒骨，掃描電鏡觀察細(xì)胞在支架上的生長情況。 結(jié) 果 BM SCs 成骨誘導(dǎo)7 d，ALP 染色示胞漿內(nèi)可見藍(lán)染顆粒，胞核呈紅色；成血管內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)14 d，CD31、CD34 免疫細(xì)胞化學(xué)染色呈陽性。MTT 檢測結(jié)果顯示，實驗組細(xì)胞增殖較對照組緩慢，培養(yǎng)3 ～ 8 d 兩組細(xì)胞吸光度值差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。細(xì)胞接種密度為（0.25 ～ 1.00）× 106個/mL 時，兩組黏附率隨接種密度增加而上升；接種密度為1.00 × 106個/mL 時，黏附率達(dá)最高；當(dāng)接種密度gt; 2.00 × 106個/mL，黏附率明顯降低。兩組各細(xì)胞接種密度間的黏附率比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。掃描電鏡觀察顯示，體外誘導(dǎo)的成骨細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附于支架上仍可分化增殖，細(xì)胞胞體見絲狀偽足。 結(jié)論 大鼠BMSCs 誘導(dǎo)培養(yǎng)的成骨細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞在20% Col Ⅰ修飾的異體凍干顆粒骨上生長狀態(tài)良好，可用于構(gòu)建血管化組織工程骨。