目的 不同強度和持續(xù)時間下FGF 信號的生物效應可能不同,探討FGF 信號持續(xù)增強對體外培養(yǎng)小鼠骺板生長的影響及可能機制。 方法 取胚胎期15 d 的C57BL/6J 小鼠掌骨建立體外培養(yǎng)模型,分為3 組(各40 只掌骨)。對照組加入0.1% DMSO,bFGF 組加入100 μg/L bFGF 和0.1% DMSO,PD98059 組加入100 μg/L bFGF 和50μmol/ L PD98059(含0.1% DMSO)。培養(yǎng)6 d 后用Calcein 溶液對掌骨的鈣化組織染色,測量其總長度(total length,TL)和鈣化組織長度(ossified tissue length,OSL)的增加百分率。培養(yǎng)7 d 提取骺板軟骨細胞的RNA,實時熒光定量PCR 儀檢測Ⅱ型膠原(collagen type Ⅱ,Col Ⅱ)、Col Ⅹ、Ihh(Indian hedgehog)基因表達的變化。 結 果 胚胎小鼠的掌骨在體外培養(yǎng)條件下繼續(xù)生長發(fā)育。培養(yǎng)6 d 后,bFGF 組掌骨TL 增加百分率與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05),OSL增加百分率顯著小于對照組(P lt; 0.05);PD98059 組掌骨TL 增加百分率和OSL 增加百分率與對照組比較差異均無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05),但均較bFGF 組顯著提高(P lt; 0.05)。培養(yǎng)7 d,bFGF 組Ihh、Col Ⅱ和Col Ⅹ基因表達的相對含量均較對照組顯著降低(P lt; 0.05);PD98059 組Col Ⅱ和Col Ⅹ基因表達的相對含量與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05),但顯著高于bFGF 組(P lt; 0.05),Ihh 基因表達的相對含量均顯著高于對照組和bFGF 組(P lt; 0.05)。 結論 持續(xù)的FGF 信號增強可能通過Ihh 下調來影響Col Ⅱ和Col Ⅹ表達,使體外培養(yǎng)的骺板生長遲滯。細胞外信號調節(jié)激酶信號通路可能在上述機制中發(fā)揮重要作用。
目的 探討將骺板軟骨細胞復合三維支架經(jīng)體外培養(yǎng),構建組織工程軟骨的效果及其生物學特點。方法 將3周齡幼兔第1代骺板軟骨細胞與液態(tài)的生物凝膠混合,接種于聚磷酸鈣纖維/L-聚乳酸(CPPF/PLLA)三維支架材料,構建組織工程軟骨組織塊,連續(xù)培養(yǎng)4周。行大體、倒置顯微鏡及組織學、Ⅰ型和Ⅱ型膠原免疫組織化學光鏡觀察,定量檢測硫酸糖胺多糖(GAG)含量。結果 構建的組織工程軟骨塊在培養(yǎng)過程中能保持其初始外形,種子細胞呈穩(wěn)定的三維均相分布,外觀逐漸呈乳白色、半透明,硬度亦不斷增加。培養(yǎng)1周有軟骨細胞陷窩形成,2周后形成富含Ⅱ型膠原和蛋白聚糖、具有典型軟骨組織結構的工程化軟骨,且Ⅰ型膠原逐漸轉為陰性。4周時構建軟骨的組織結構與天然骺板軟骨相類似,硫酸GAG含量平均為天然骺板軟骨的34%以上。結論 骺板軟骨細胞復合三維支架體外培養(yǎng)可生成典型軟骨,且可形成類似天然骺板軟骨的組織結構,能滿足修復骺板缺損的基本要求。體外培養(yǎng)1~2周可能是植入體內修復骺板缺損的較佳時機。
目的探討在體外以三維支架構建的組織工程骺板軟骨修復脛骨上骺板缺損的效果,了解促進植入工程化軟骨與受區(qū)骺板融合方法的效果. 方法酶消化分離幼兔骺板軟骨細胞并接種培養(yǎng),收獲第1代軟骨細胞,制成2.5×107/ml的細胞凝膠混懸液,接種于聚磷酸鈣纖維/L-聚乳酸(CPPf/PLLA)復合支架體外構建組織工程化軟骨.采用幼兔右側脛骨上骺板40%缺損模型,將日本大耳白兔72只分為4組,每組18只:A組缺損區(qū)植入同窩幼兔來源的工程化軟骨,并以相同的細胞凝膠混懸液充填其間隙;B組充填復合有生物凝膠而無細胞的CPPf/PLLA支架材料; C組植入皮下脂肪;D組不做任何充填.分別于術后2、4、6、8、12和16周攝X線片、大體及組織學觀察. 結果 A組術后2周組織工程化軟骨在骺板缺損區(qū)即衍生為典型的骺板組織結構,并與受區(qū)骺板組織很好融合;4周修復骺板組織,結構正常、脛骨無畸形;8周后骺板修復區(qū)出現(xiàn)早閉的組織學表現(xiàn),脛骨出現(xiàn)短縮和內翻畸形;16周修復區(qū)骺板已閉合,脛骨畸形明顯,生長功能恢復率為43.6%.B、C、D 3組術后2周脛骨即出現(xiàn)畸形;4周骺板缺損區(qū)均已骨性閉合,畸形明顯;16周畸形嚴重.后三組間差異無統(tǒng)計學意義,骺板缺損區(qū)無骨生長. 結論組織工程化的骺板軟骨能夠修復骺板軟骨缺損;以細胞-凝膠混懸液充填間隙,促進了組織工程化軟骨與受區(qū)骺板軟骨間組織融合,并使其生長功能獲得一定程度的恢復.
目的 探討骺板再開放、骺軟骨植入治療兒童骺板部分早閉的手術及評價其療效。方法 對10例骺板部分早閉造成的肘、膝關節(jié)內、外翻畸形,行單純髁上楔形截骨6例,在截骨同時采取骺板再開放、骺軟骨植入4例。結果 10例患兒均獲得隨訪,隨訪時間為6個月~5年。單純截骨者,術后畸形復發(fā)1例,肢體不等長2例。在截骨同時行骺板再開放、骺軟骨植入者內、外髁高度相等,肢體等長,無復發(fā)。結論 采用骺板再開放、骺軟骨植入的方法,可以有效地預防畸形復發(fā),恢復肢體縱向生長能力。
兒童骨折中可能涉及骨骺及骺板損傷,骺板損傷可導致骨骺與干骺端之間形成骨橋,骺板提前閉合,造成肢體短縮和(或)成角畸形,影響兒童生長發(fā)育。骨骺及骺板損傷的早期診斷和治療仍是小兒矯形外科的難題。現(xiàn)有的診斷方法和治療方法眾多,但都不甚滿意,現(xiàn)就兒童骨骺及骺板損傷的診斷和治療進展進行綜述。
目的 探討 3-D 打印技術在青少年脛骨遠端骨折累及骺板損傷手術中的應用價值。 方法 回顧分析 2014 年 1 月—2015 年 12 月采用 3-D 打印技術行手術治療的 16 例脛骨遠端骨折累及骺板損傷患兒臨床資料。男 12 例,女 4 例;年齡 9~14 歲,平均 12.8 歲。致傷原因:交通事故傷 9 例,重物砸傷 3 例,運動傷 4 例。受傷至手術時間 3~92 h,平均 25.8 h。累及骺板的骨折按 Salter-Harris 進行分型:Ⅱ 型 11 例、Ⅲ 型 4 例、Ⅵ 型 1 例。術前對患肢行薄層 CT 掃描,應用 Mimics14.0 醫(yī)學軟件進行設計,并使用 3-D 打印機打印出 1∶1 骨折模型;在骨折模型上模擬手術復位操作并選擇合適大小的接骨板、克氏針、空心螺釘,設計完整的手術入路、手術方式、選擇內固定物,根據(jù)術前設計方案進行實際手術。 結果 手術時間 40~68 min,平均 59.1 min;術中出血量 5~102 mL,平均 35 mL;術中透視次數(shù) 2~6 次,平均 2.8 次。16 例患兒均獲隨訪,隨訪時間 12~24 個月,平均 15 個月。其中 15 例患兒骨折達解剖復位,1 例骨折未解剖復位,斷端移位<1 mm。術后患兒骨折均達骨性愈合,愈合時間 2~4 個月,平均 2.6 個月。均無下肢深靜脈血栓形成、骨骺早閉、踝關節(jié)面傾斜或不平發(fā)生,未并發(fā)骨髓炎,無踝關節(jié)內外翻畸形、關節(jié)僵直、創(chuàng)傷性關節(jié)炎等并發(fā)癥發(fā)生。術后 12 個月行患肢踝關節(jié)功能 Helfet 評分,獲優(yōu) 15 例,良 1 例。患側內外翻成角為(6.56±2.48)°,生長長度為(4.44±2.31)mm,與健側[(6.50±1.51)°、(4.69±1.08)mm]比較差異均無統(tǒng)計學意義(t=0.086,P=0.932;t=0.392,P=0.697)。 結論 3-D 打印技術作為輔助技術,對改善脛骨遠端骨折累及骺板損傷手術效果具有一定的臨床應用價值。
目的通過總結目前兒童和青少年前交叉韌帶(anterior cruciate ligament,ACL)損傷的管理現(xiàn)狀,以期為兒童和青少年ACL損傷的管理提供借鑒。方法廣泛查閱近年國內外相關文獻,總結兒童和青少年ACL損傷的管理現(xiàn)狀。結果目前,每年兒童和青少年ACL損傷患者數(shù)量在逐步增加。其診斷主要依靠癥狀和體征,常用治療方式包括康復治療和骨骺保留重建、全骺板內重建、部分經(jīng)骺板重建和穿骺板重建等手術技術。結論應加強對兒童和青少年膝關節(jié)的動態(tài)監(jiān)測;根據(jù)患者的實際年齡、骨齡、Tanner分期及生理狀況如月經(jīng)、身體增長速度等特點,選擇針對兒童和青少年ACL損傷治療的最佳方法。