目的 研究新生豚鼠心肌缺血 -再灌注時(shí)興奮性鳥(niǎo)核苷耦聯(lián)蛋白 α亞基 (Gsα)和抑制性蛋白 α亞基 (Giα)含量的變化以及 St. Thomas 號(hào)液和冷血心臟停搏液對(duì)這種變化的不同影響?！》椒ā?30只新生豚鼠隨機(jī)分為 3組 ,建立離體心臟左心做功模型 ,組 (n=10 ) :低溫對(duì)照 ;組 (n=10 ) :St.Thomas 號(hào)液灌注 ;組 (n=10 ) :冷血心臟停搏液灌注。采用 Western印跡雜交法研究 Gsα和 Giα蛋白含量的變化。 結(jié)果 缺血前 3組的 Gsα和 Giα蛋白含量差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。缺血后 ,組 和組 Gsα蛋白水平顯著低于缺血前 (Plt;0 .0 1) ,組 較缺血前無(wú)明顯降低 (Pgt;0 .0 5 )。再灌注后 ,組 Gsα蛋白與缺血前水平相近 (Pgt;0 .0 5 ) ,且明顯高于組 和組 (Plt;0 .0 1)。缺血后和再灌注后 ,組 的 Giα蛋白含量與缺血前比較差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (Pgt;0 .0 5 ) ,明顯低于組 和組 (Plt;0 .0 1) ;組 和組 仍明顯高于缺血前 (Plt;0 .0 1)?！〗Y(jié)論 更多新生豚鼠心肌 2 0℃缺血 -再灌注時(shí) Gsα蛋白含量明顯降低 ,而 Giα蛋白含量顯著升高。 St. Thomas 號(hào)液不能改變這種變化 ,而冷血心臟停搏液可使新生豚鼠心肌再灌注后的 Gsα和 Giα蛋白含量恢復(fù)至缺血前水平。Gsα和 Giα蛋白的平衡遭受破壞可能是未成熟心肌缺血 -再灌注損傷發(fā)生
目的探討細(xì)胞骨架重塑對(duì)體外大鼠跟腱來(lái)源肌腱干細(xì)胞（tendon stem cells,TSCs）成脂分化的影響。 方法取3周齡雄性SD大鼠跟腱組織，采用酶消化法分離、培養(yǎng)TSCs，取第3代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。將細(xì)胞分別以細(xì)胞松弛素D（cytochalasin D,CYD）終濃度為0、50、100、500、1 000 ng/mL的含15%FBS的DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞存活及形態(tài)變化，纖維肌動(dòng)蛋白（fibros actin,F-actin）染色觀察細(xì)胞骨架，Western blot檢測(cè)F-actin/球狀肌動(dòng)蛋白（globular actin,G-actin）比值，根據(jù)結(jié)果選擇CYD有效使用濃度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。取TSCs分別采用成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基（誘導(dǎo)組）、含CYD的成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基（CYD+誘導(dǎo)組）以及普通培養(yǎng)基（普通組）、含CYD的普通培養(yǎng)基（CYD+普通組）培養(yǎng)3、7 d，收集各組細(xì)胞行實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)成脂分化相關(guān)特異標(biāo)志性基因表達(dá)，包括過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ（peroxisome proliferator-activated receptor γ, PPARγ）、脂蛋白酯酶（1ipoprotein lipase,LPL）、脂肪酸結(jié)合蛋白(aP2)，Western blot檢測(cè)PPARγ、aP2蛋白表達(dá)。 結(jié)果CYD濃度為100 ng/mL時(shí)既能有效干擾TSCs細(xì)胞骨架F-actin的聚合，又不影響TSCs的存活，選擇該濃度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR及Western blot檢測(cè)示，3、7 d時(shí)CYD+誘導(dǎo)組PPARγ、LPL和aP2基因及PPARγ、aP2蛋白表達(dá)均顯著高于誘導(dǎo)組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。3、7 d時(shí)CYD+普通組PPARγ、LPL和aP2基因表達(dá)也顯著高于普通組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 結(jié)論細(xì)胞骨架重塑是TSCs成脂分化的一個(gè)先決條件，抑制F-actin聚合可促進(jìn)TSCs的成脂分化，對(duì)肌腱病的發(fā)病機(jī)制研究具有重要意義。
目的 探討東亞人群中MDM2 SNP309與胃癌風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系。方法 計(jì)算機(jī)檢索MEDLINE、EMbase和CBM數(shù)據(jù)庫(kù)，檢索時(shí)限均為1990.1.1至2012.12.23，搜集研究東亞人群中MDM2 SNP309與胃癌風(fēng)險(xiǎn)的病例-對(duì)照研究。由兩位研究者獨(dú)立進(jìn)行文獻(xiàn)篩選、資料提取和納入研究的方法學(xué)質(zhì)量評(píng)價(jià)后，采用RevMan 5.0軟件進(jìn)行Meta分析。結(jié)果 共納入5個(gè)病例-對(duì)照研究，包括1 621例胃癌患者，2 639例對(duì)照。Meta分析結(jié)果顯示：與野生型純合子（309TT）基因型個(gè)體相比，變異純合子（309GG）基因型個(gè)體與胃癌風(fēng)險(xiǎn)增高相關(guān)［OR=1.54，95%CI（1.04，2.29），P=0.02］，然而雜合子（309TG）基因型個(gè)體與胃癌風(fēng)險(xiǎn)增高相關(guān)性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義［OR=1.03，95%CI（0.75，1.42），P=0.006］。在隱形遺傳模式中（GG vs. TG/TT）胃癌風(fēng)險(xiǎn)增高且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義［OR=1.49，95%CI（1.20，1.84），P=0.07］，但在顯性遺傳模式中（GG/TG vs. TT）這種風(fēng)險(xiǎn)增高無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義［OR=1.18，95%CI（0.84，1.65），P=0.001］。結(jié)論 在東亞人群中，MDM2 309GG基因型個(gè)體可能存在較高的胃癌風(fēng)險(xiǎn)。
目的：了解大鼠腦出血后血腫周?chē)M織細(xì)胞凋亡與神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）的表達(dá)及大鼠神經(jīng)功能缺損程度的關(guān)系。方法：用膠原酶注入到大鼠尾狀核的方法制作腦出血模型。將大鼠分為腦出血、假手術(shù)組、正常組3組。采用蘇木素伊紅(HE) 染色、NSE免疫組織化學(xué)染色及TUNEL分別觀察各組在腦出血后第6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、5 d、7 d時(shí)血腫周?chē)鶱SE及TUNEL的表達(dá)。用Longa評(píng)分法評(píng)價(jià)大鼠神經(jīng)功能缺損程度。結(jié)果：大鼠在膠原酶注入6 h后形成穩(wěn)定的血腫，在造模24～48 h神經(jīng)功能缺損程度最重；6 h即見(jiàn)到TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)，在48 h最明顯；NSE從神經(jīng)元中漏出彌散到細(xì)胞間隙也在48 h達(dá)高峰。結(jié)論：腦出血血腫周?chē)蛲雠c神經(jīng)功能缺損及NSE的變化有關(guān)，凋亡可能在腦出血的神經(jīng)損傷中起重要的作用。
摘要:目的:動(dòng)態(tài)觀察大鼠腦出血后血腫周?chē)M織補(bǔ)體激活與細(xì)胞凋亡的規(guī)律。方法:用膠原酶注入到大鼠尾狀核的方法制作腦出血模型。將大鼠分為腦出血、假手術(shù)組、正常組3組。采用蘇木素伊紅(HE) 染色、免疫組織化學(xué)染色及原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP 缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)分別觀察各組在腦出血后第6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、5 d、7 d時(shí)血腫周?chē)a(bǔ)體C3、促凋亡基因(Bax)、抑凋亡基因(Bclxl)及TUNEL的表達(dá)。結(jié)果補(bǔ)體C3的表達(dá)峰值在24~48 h;TUNEL、Bax蛋白表達(dá)術(shù)后12h增加,48~72 h達(dá)高峰,而B(niǎo)clxl蛋白表達(dá)高峰在48h。結(jié)論:大鼠腦出血后血腫周?chē)M織補(bǔ)體C3的表達(dá)增加與細(xì)胞凋亡的演變趨勢(shì)一致,C3與凋亡有相關(guān)。Abstract: Objective: To study the complement activation and apoptosis regular genes changes in the tissues of the perihematoma of intracerebral hemorrhage (ICH) in rats. Methods: Intracerebral hemorrhage was induced in rats by injection of bacterial collagenase into the caudate nucleus. Histopathological changes were studied in 6 h,12 h, 24 h, 2 d, 3 d, 5 d, 7 d after the injection. The immunohistochemistry and TUNEL analysis were performed. The expression of complement factor C3, the TUNELpositive cells, the proapoptotic gene expression (Bax) and the antiapoptotic gene (Bclxl) were examined. Results: The expression of C3 increased to its maximum between 2448 h. The TUNELpositive cells and Bax protein expression increased gradually and reached the peak level between 4872 h. The Bclxl protein reached the peak level at 48 h. The correlation analysis showed that the quantity of C3 was positively related to that of the TUNELpositive cells, but the bax protein was not related to Bclxl protein. Conclusion: The expression of complement factor C3 may contributes to the nerve injury after cerebral hemorrhage and relate to the apotosis in the tissues surrounding the hametoma in rats.
摘要:目的:探討卡配因抑制劑3（MDL28170）對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。方法:建立新生SD大鼠HIBD模型,治療組于缺養(yǎng)缺血后即刻、2 h、4 h腹腔內(nèi)注射MDL28170,對(duì)照組及手術(shù)組同時(shí)予生理鹽水。缺氧缺血后24 h用免疫組化方法觀察大腦皮質(zhì)及海馬CA1區(qū)Caspase3 蛋白表達(dá)、TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡,觀察組織病理改變并計(jì)算海馬神經(jīng)元死亡數(shù),透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果:缺氧缺血后24 h缺血側(cè)大腦皮質(zhì)及海馬CA1區(qū)Caspase3和TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較對(duì)照組明顯增加,透射電鏡證實(shí)有凋亡細(xì)胞;MDL28170可減少陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量,抑制神經(jīng)元死亡,差異有顯著性(Plt;0.05)。結(jié)論:MDL28170可通過(guò)抑制神經(jīng)凋亡而對(duì)新生大鼠HIBD具有一定保護(hù)作用。Abstract: Objective: To investigate the effect of (Calpain inhibitor3) MDL28170 on neural apoptosis in a neonatal model of hypoxicischemic brain damage (HIBD). Methods: A neonatal model of HIBD was established, 7dayold SD rats were divided into three groups. The treatment group received MDL28170(ip) at 0 h,2 h,4 h after HI, whereas the other two groups were administered normal saline simultaneously. The expression of caspase3 (by immunohistochemistry), neural apoptosis (by TUNEL) in cortex and hippocampus ipsilateral to the insult were observed 24 h after HI; hippocampal CA1 neural loss and electromicroscopic changes were assessed at the same time. Results: Apoptotic body was observed by electromicroscopy. Caspase3 positive cells and apoptotic cells increased significantly in the ipsilateral cortex and hippocampal CA1 region compared to the control, and MDL28170 reduced the number of positive cells, attenuated CA1 neural loss with significance (Plt;0.05). Conclusion: It is suggested that MDL28170 may protect the brain of neonatal rats after HIBD by suppressing neural apoptosis.
目的：建立存活時(shí)間較長(zhǎng)的急性重癥肝炎小鼠模型。方法：將50只BALB/c小鼠平均分成5組，其中A、B、C、D 4組為實(shí)驗(yàn)組，E組為對(duì)照組；實(shí)驗(yàn)組分別給予D氨基半乳糖（D-GalN）和脂多糖（LPS），劑量分別為800 mg/kg和10 μg/kg、500 mg/kg和10 μg/kg、500 mg/kg和5 μg/kg、300 mg/kg和5 μg/kg，用生理鹽水稀釋至1 mL，行腹腔注射；對(duì)照組E腹腔注射生理鹽水2 mL。以12 h死亡率、24 h死亡率及肝組織學(xué)改變?yōu)橛^察指標(biāo)。結(jié)果：A、B、C、D及E組小鼠12 h死亡率分別為80%%、30%、10%、0和0；24 h死亡率分別為90%、60%、30%、0和0；A和B組小鼠肝組織學(xué)均呈急性重癥肝炎表現(xiàn)，C組中有5只小鼠肝組織學(xué)符合重癥肝炎的表現(xiàn)，而該組其余小鼠及D組所有肝組織學(xué)雖有炎癥改變，但達(dá)不到重癥肝炎的程度，E組肝組織學(xué)表現(xiàn)正常。結(jié)論：LPS 10 μg/kg聯(lián)合D- GalN 500 mg/kg可成功建立12 h存活率較高的急性重癥肝炎小鼠模型。
目的：建立能表達(dá)乙肝病毒（hepatitis B virus,HBV）preS2S抗原蛋白的荷瘤小鼠模型，為研究HBV核酸疫苗的體內(nèi)CTL應(yīng)答及免疫治療作用提供簡(jiǎn)便易行的研究模型。 方法：以免疫印跡法驗(yàn)證SP2/0-S2S細(xì)胞中有HBV preS2S抗原的穩(wěn)定表達(dá)，將SP2/0-S2S細(xì)胞種植到BALB/c小鼠脅部皮下（荷瘤），觀察能否生長(zhǎng)成瘤，以及成瘤的時(shí)間、腫瘤大小和荷瘤后小鼠的生存時(shí)間；以免疫組織化學(xué)法檢測(cè)小鼠腫瘤組織HBV preS2S抗原的表達(dá)。以不表達(dá)preS2S抗原蛋白的SP2/0-CMV細(xì)胞荷瘤小鼠作為陰性對(duì)照。結(jié)果：荷瘤后3天～1周，SP2/0-S2S細(xì)胞可在小鼠皮下形成實(shí)體腫瘤，成瘤率為100%，腫瘤細(xì)胞中有preS2S抗原表達(dá)，荷瘤后小鼠的平均生存時(shí)間為16±1天；與不表達(dá)preS2S抗原蛋白的SP2/0-CMV細(xì)胞荷瘤小鼠相比，成瘤率、成瘤時(shí)間、腫瘤大小及生存時(shí)間差異。結(jié)論：建立了能表達(dá)HBV preS2S抗原蛋白的荷瘤小鼠模型，可用于HBV核酸疫苗的體內(nèi)CTL應(yīng)答及免疫治療作用的實(shí)驗(yàn)研究。同時(shí)也建立了不表達(dá)preS2S抗原蛋白的荷瘤小鼠模型，可用作陰性對(duì)照。
目的 研究胃袖帶切除術(shù)（sleeve gastrectomy，SG）對(duì)GK大鼠2型糖尿?。╰ype 2 diabetes mellitus，T2DM）的治療作用及其可能機(jī)理。方法 將13只12周齡的GK大鼠隨機(jī)分為2組：SG組7只和假手術(shù)組（SO組） 6只，分別行SG術(shù)和假手術(shù)。于術(shù)前及術(shù)后1、4、10和26周測(cè)量2組大鼠的體質(zhì)量、24h進(jìn)食量、空腹血糖值、血清胰高血糖素樣肽-1 （glucagon-like peptide-1，GLP-1）和血清生長(zhǎng)激素釋放肽（Ghrelin）濃度；于術(shù)后10周檢測(cè)2組大鼠的糞便能量含量，并進(jìn)行口服葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)（OGTT）和胰島素耐受性實(shí)驗(yàn)（ITT）。結(jié)果?、袤w質(zhì)量：各時(shí)點(diǎn)2組大鼠的體質(zhì)量比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；與術(shù)前比較，術(shù)后1周2組大鼠的體質(zhì)量均降低（P＜0.01），術(shù)后10和26周的體質(zhì)量均增加（P＜0.01）。②24h進(jìn)食量：與SO組比較，術(shù)后4和10周SG組大鼠的24h進(jìn)食量均較低（P＜0.05）。與術(shù)前比較，SG組大鼠術(shù)后1、4及10周的進(jìn)食量均較低（P＜0.05），SO組大鼠術(shù)后1周的進(jìn)食量低于術(shù)前（P＜0.05）。③空腹血糖值：與SO組比較，術(shù)后各時(shí)點(diǎn)SG組大鼠的空腹血糖值均較低（P＜0.01）。與術(shù)前比較，SG組大鼠術(shù)后各時(shí)點(diǎn)的空腹血糖值均較低（P＜0.01），而SO組大鼠僅術(shù)后1周明顯低于術(shù)前（P＜0.01）。④血清GLP-1水平：與SO組比較，術(shù)后4、10及26周SG組大鼠的血清GLP-1水平均較高（P＜0.05）。與術(shù)前比較，術(shù)后4、10及26周SG組大鼠的血清GLP-1水平較高（P＜0.05），而術(shù)后SO組大鼠的血清GLP-1水平無(wú)明顯變化（P＞0.05）。⑤血清Ghrelin水平：與SO組比較，術(shù)后各時(shí)點(diǎn)SG組大鼠的血清Ghrelin水平均較低（P＜0.01）。與術(shù)前比較，術(shù)后各時(shí)點(diǎn)SG組大鼠的血清Ghrelin水平均較低（P＜0.001），而SO組大鼠的血清Ghrelin水平無(wú)明顯變化（P＞0.05）。⑥曲線下面積（AUC）：SG組大鼠的AUC （OGTT和ITT）均較SO組低（P＜0.01）。結(jié)論 SG術(shù)可以明顯降低GK大鼠的空腹血糖值，改善葡萄糖耐量及增強(qiáng)胰島素敏感性，該作用可能是GLP-1、Grelin等多種胃腸道激素共同作用的結(jié)果。SG術(shù)可能是潛在的非肥胖型T2DM的治療方法。
目的 通過(guò)建立不同體積供肝的大鼠肝移植模型，探索邊緣性體積供肝大小的適宜范圍，為研究小肝綜合征的發(fā)病機(jī)理及防治措施提供一種易于復(fù)制的小動(dòng)物模型。方法 將192只大鼠隨機(jī)分為全肝移植組、半肝移植組、小體積供肝移植組及超小體積供肝移植組，每組48只，分別建立全肝、半肝、小體積供肝和超小體積供肝的大鼠肝移植模型。移植術(shù)后，4組各抽取24只大鼠用于觀察存活率；抽取12只大鼠于移植術(shù)前，移植術(shù)后5、15、30、45及60min測(cè)定門(mén)靜脈壓力；另12只大鼠于術(shù)后24h測(cè)定谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）水平。結(jié)果 全肝移植組的7d累積生存率為100% （24/24），半肝移植組為87.5% （21/24），小體積供肝移植組為37.5%（9/24），超小體積供肝移植組均于術(shù)后48h內(nèi)死亡。全肝移植組術(shù)中開(kāi)放門(mén)靜脈后，60min內(nèi)其門(mén)靜脈壓力穩(wěn)定；半肝移植組大鼠在開(kāi)放門(mén)靜脈后，其門(mén)脈壓力雖有小幅升高，但仍保持相對(duì)穩(wěn)定；而小體積供肝移植組和超小體積供肝移植組開(kāi)放門(mén)靜脈后，其門(mén)靜脈壓力均顯著升高，15min時(shí)均達(dá)到高峰，之后該2組的門(mén)靜脈壓力開(kāi)始回落，至45～60min時(shí)逐漸穩(wěn)定。供肝的體積大小與開(kāi)放門(mén)靜脈后5 （r=-0.942）、15 （r=-0.947）、30 （r=-0.900）、45 （r=-0.825）和60min （r=-0.705）時(shí)的門(mén)靜脈壓力均呈負(fù)相關(guān)關(guān)系（P＜0.001）。肝移植術(shù)后24 h，全肝移植組和半肝移植組ALT水平均低于小體積供肝移植組及超小體積供肝移植組（P＜0.05），且小體積供肝移植組ALT水平低于超小體積供肝移植組（P＜0.05）。供肝體積的大小與大鼠移植術(shù)后的ALT水平呈負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=-0.685，P＜0.001）。結(jié)論 大鼠部分肝移植模型中，供肝與受體標(biāo)準(zhǔn)肝臟體積比（GV/SLV）的安全界限為50%，GV/SLV為30%～35%的供肝可視為邊緣性體積供肝，小于30%的供肝可視為超小體積供肝。