目的 探討應(yīng)用多孔高密度聚乙烯（Medpor）作為再造耳支架對(duì)先天性小耳或后天耳廓缺失患者進(jìn)行再造的可行性。 方法 1999年2月～2004年2月收治61例耳廓缺失患者，男38例，女23例；年齡5～61歲。先天性小耳40例，其中雙側(cè)1例，單側(cè)39例；外傷后耳廓缺損21例，其中雙側(cè)6例，單側(cè)15例。應(yīng)用耳后軟組織擴(kuò)張法，以Medpor為支架行耳廓再造術(shù)。手術(shù)分二期，一期為耳后皮膚軟組織擴(kuò)張器置入術(shù)；二期為耳廓再造術(shù)。以耳后擴(kuò)張皮瓣或擴(kuò)張的耳后瘢痕瓣和乳突區(qū)皮下組織筋膜瓣包裹Medpor支架，再造耳廓。 結(jié)果 61例耳廓再造術(shù)患者均痊愈出院，獲隨訪6個(gè)月～5年1個(gè)月，平均2.8年。其中49例（80.3%）患者對(duì)手術(shù)結(jié)果滿意，7例（11.5％）認(rèn)為再造耳手術(shù)效果尚可，3例（4.9%）發(fā)生了支架外露，對(duì)手術(shù)效果不滿意，2例（3.3%）于術(shù)后6個(gè)月行自體肋軟骨移植，置換Medpor支架。 結(jié)論 擴(kuò)張法耳廓再造術(shù)中，對(duì)不適合、不能或不愿取用自體肋軟骨作為再造耳支架的患者，應(yīng)用Medpor耳支架，是一種較為安全、簡(jiǎn)便及可行的方法。
對(duì)半面萎縮的治療采用改良自體脂肪顆粒移植技術(shù)，提 高脂肪成活率，減少術(shù)后脂肪液化、壞死、吸收等并發(fā)癥。方法 1999 年3月～2004年10月，治療31例穩(wěn)定期半面萎縮患者。男12例，女19例；年齡19～28歲,平均 23５歲。根據(jù)半面萎縮范圍不同分成3型，輕度萎縮9例，中度萎縮19例，重度萎縮3例。 根據(jù)以往研究結(jié)果和文獻(xiàn)的總結(jié)分析，在脂肪的獲取和移植上，采用低位供區(qū)、低壓抽取、 低速離心和多點(diǎn)、多隧道、多層面放射狀注射移植。經(jīng)術(shù)前、術(shù)后正位、側(cè)位45°及90°照 片比較，以及術(shù)后表情是否自然，局部有無(wú)硬塊和囊腫，患者感覺(jué)舒適度等評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，并根 據(jù)隨訪結(jié)果決定是否需再次手術(shù)。結(jié)果術(shù)后31例均達(dá)到面部外形基本 對(duì)稱。1次注射15例，2次13例，3次3例。第3次注射后較第2次效果好，第2次注射比第1次效果好，且注射量逐次減少。下頜部注射量8~14 ml，平均11 ml；頰部注射量15~25 ml， 平均20 ml；顴部注射5~10ml，平均75 ml；額部注射量18~20 ml，平均19 ml?；颊唠S 訪3～5年，未發(fā)現(xiàn)感染、硬結(jié)、皮下包塊、囊腫或其他并發(fā)癥。患側(cè)皮膚色素增生明顯減輕。與傳統(tǒng)治療方法比較，自體脂肪顆粒注射移植治療能達(dá)滿意面 部對(duì)稱，且無(wú)供區(qū)損傷及受區(qū)并發(fā)癥，是治療半面萎縮一種較理想的手術(shù)方法。
目的 觀察家豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 (marrow mesenchymal stem cells, MSCs) 在體外誘導(dǎo)條件下成骨分化的特征及相關(guān)基因的表達(dá)。方法 選取3月齡雌性長(zhǎng)白豬6頭，無(wú)菌條件下于脛骨近端抽取骨髓15 ml。采用密度梯度離心法并根據(jù)細(xì)胞貼壁特性對(duì)MSCs進(jìn)行分離、純化，倒置相差顯微鏡觀察原代細(xì)胞生長(zhǎng)情況，于培養(yǎng)第7天計(jì)算MSCs百分比含量及群體倍增值。將第1代細(xì)胞置于含1×10-8 mmol/L 地塞米松(dexamethasone, Dex)、10 mmol/Lβ-磷酸甘油(β-glycerophosphate, β-GP)和82 μg/ml 抗壞血酸(ascorbic acid, Asc)的成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液中培養(yǎng)21 d，作為實(shí)驗(yàn)組；DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)作為對(duì)照組。分別行細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、堿性磷酸酶 (alkaline phosphatase, ALP)組織化學(xué)染色、鈣沉積和細(xì)胞增殖測(cè)定，采用實(shí)時(shí)定量PCR分析成骨分化的相關(guān)基因表達(dá)。結(jié)果 原代MSCs特征：培養(yǎng)第1天，有核細(xì)胞大部分由懸浮的圓形血源性細(xì)胞組成；第3天換液棄除非貼壁細(xì)胞，MSCs克隆開始形成，細(xì)胞呈成纖維細(xì)胞樣生長(zhǎng)；第7天，鏡下觀察到大小不一的克隆。細(xì)胞在培養(yǎng)后12～14 d基本長(zhǎng)滿，原代細(xì)胞群體倍增值平均為13。MSCs成骨分化：誘導(dǎo)培養(yǎng)14 d實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞形態(tài)由成纖維細(xì)胞樣變成立方體樣，而對(duì)照組細(xì)胞始終保持成纖維細(xì)胞樣。培養(yǎng)5 d，對(duì)照組細(xì)胞計(jì)數(shù)為11 723±4 040，實(shí)驗(yàn)組為10 276±5 513，二者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組誘導(dǎo)培養(yǎng)14 d，ALP染色呈強(qiáng)陽(yáng)性，21 d鈣沉積明顯增加 (P＜0.01)。實(shí)驗(yàn)組MSCs成骨相關(guān)基因：核心結(jié)合因子α1 (core binding factor α1, Cbfα1)、osterix、ALP、Ⅰ型膠原、骨連接素(osteonectin, ON)、骨鈣素(osteocalcin, OC)表達(dá)逐漸增強(qiáng)；Cbfα1、ALP、ON在分化早期增加明顯；與第7天比較，第21天osterix和OC基因表達(dá)明顯上調(diào) (P＜0.05)；第14天，Ⅰ型膠原表達(dá)也上調(diào) (P＜0.05)。結(jié)論 密度梯度離心法分離的豬MSCs，在體外誘導(dǎo)條件下能通過(guò)上調(diào)分化特異基因表達(dá)向成骨細(xì)胞分化。
目的 探討缺氧缺血性腦損傷(hypoxia ischemia brain damage, HIBD)時(shí)缺氧誘導(dǎo)因子1α（hypoxia inducible factor 1α, HIF 1α）表達(dá)與神經(jīng)元凋亡的相關(guān)性，探索HIF-1α在神經(jīng)元凋亡中的作用及對(duì)損傷神經(jīng)修復(fù)重建的意義。方法 新生10 d SD大鼠40只，隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，每組20只。實(shí)驗(yàn)組在乙醚麻醉下行右側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎，氮氧混合氣（92%氮?dú)狻?%氧氣 ）缺氧2.5h，即為HIBD模型；對(duì)照組分離頸總動(dòng)脈，不結(jié)扎，不作缺氧處理。分別于術(shù)后4、8、24、48及72h處死兩組動(dòng)物取腦組織，應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)HIF-1α、活化的半胱天冬氨酸酶3（cleaved caspase 3，CC3）的表達(dá)，應(yīng)用TUNEL檢測(cè)凋亡細(xì)胞。結(jié)果 實(shí)驗(yàn)組HIF-1α蛋白表達(dá)在術(shù)后4h明顯升高，8 h達(dá)高峰，24h后下降；CC3蛋白于術(shù)后4 h開始表達(dá)，8 h有少量表達(dá)，24h明顯升高，48h及72h維持較高 水平。對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)HIF-1α和CC3均有極少量弱陽(yáng)性表達(dá)。實(shí)驗(yàn)組HIF-1α和CC3蛋白表達(dá)明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。TUNEL染色顯示實(shí)驗(yàn)組術(shù)后隨時(shí)間延長(zhǎng)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)逐漸增多，72h達(dá)高峰；但對(duì)照組TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞極少。兩組比較差 異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。結(jié)論 HIF-1α與促凋亡蛋白CC3表 達(dá)趨勢(shì)相反， HIF-1α對(duì)新生兒HIBD神經(jīng)元可能具有保護(hù)作用，可望對(duì)缺氧缺血神經(jīng)的修復(fù)重建發(fā)揮一定作用。
目的 探討體外快速培養(yǎng)犬膀胱平滑肌細(xì)胞的方法及觀察膀胱 平滑肌細(xì)胞在脫細(xì)胞小腸黏膜下層（small intestinal submucosa, SIS）上的生長(zhǎng)狀況， 為構(gòu)建組織工程膀胱平滑肌組織提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法 分別采用酶消化 法和組織塊培養(yǎng)法分離、獲取和原代培養(yǎng)犬膀胱平滑肌細(xì)胞，倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞的 生長(zhǎng)情況，透射電鏡觀察細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，免疫組織化學(xué)染色進(jìn)行細(xì)胞鑒定。將犬膀胱平滑 肌細(xì)胞接種到SIS支架材料上，于復(fù)合培養(yǎng)5、7及9d 取材，行蘇木素染色、石蠟切片HE 染色和掃描電鏡觀察膀胱平滑肌細(xì)胞在SIS上的生長(zhǎng)狀況。以細(xì)胞SIS復(fù)合培養(yǎng)組為實(shí)驗(yàn)組 ，以膀胱平滑肌細(xì)胞為對(duì)照組，每組各設(shè)9孔，分別于接種后3、5及7d取材，酶消化后收集 細(xì)胞并計(jì)數(shù)。結(jié)果酶消化法原代培養(yǎng)獲取犬膀胱平滑肌細(xì)胞數(shù)量 多， 細(xì)胞生長(zhǎng)速度快，形態(tài)良好，培養(yǎng)5d細(xì)胞在培養(yǎng)瓶底生長(zhǎng)匯合。組織塊培養(yǎng)法接種3d見長(zhǎng) 梭形的膀胱平滑肌細(xì)胞從植塊邊緣萌出，獲取的細(xì)胞數(shù)量較少。透射電鏡下見膀胱平滑肌細(xì) 胞胞質(zhì)中有特征性細(xì)肌絲和細(xì)胞膜的密斑?？功?肌動(dòng)蛋白免疫組織化學(xué)染色胞漿呈棕黃色 陽(yáng)性反應(yīng)。膀胱平滑肌細(xì)胞在SIS表面能黏附、生長(zhǎng)和增殖。體外復(fù)合培養(yǎng)5d后，膀胱平滑 肌細(xì)胞鋪滿SIS表面，呈單層細(xì)胞結(jié)構(gòu)。7、9d細(xì)胞形態(tài)與5d相似。實(shí)驗(yàn)組3、5及7d的細(xì) 胞計(jì)數(shù)分別為（16.85±0.79）×105、（39.74±2.16）×105及（37.15±2.02）×10 5個(gè)，對(duì)照組分別為（19.43±0.54）×105、（34.50±1.85）×105及（33.07±1.31 ）×105個(gè)。兩組5d細(xì)胞計(jì)數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 酶消化法原代培養(yǎng)膀胱平滑肌細(xì)胞可提供大量活性良好的種子細(xì)胞。SIS支持膀胱平滑 肌細(xì)胞黏附和生長(zhǎng)，可為構(gòu)建組織工程膀胱平滑肌組織提供良好支架。
目的 探索自體全層皮膚移植成活過(guò)程中表皮干細(xì)胞隨微環(huán)境的改變而變化的規(guī)律，為表皮干細(xì)胞的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法Wistar大鼠42只，于背部制作1.5 cm×1.5 cm自體全層皮膚原位移植模型。按取材時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)分成7組（G1～G7組）,每組6只，分別為術(shù)后第1、3、5、7、14、21和30天；各組術(shù)前取材作對(duì)照。在各時(shí)間點(diǎn)大體觀察移植皮片情況；于手術(shù)前、后各時(shí)間點(diǎn)切取皮片組織標(biāo)本，行HE染色和免疫組織化學(xué)染色，觀察組織學(xué)變化及整合素β1和基因物質(zhì)p63陽(yáng)性細(xì)胞變化。結(jié)果 術(shù)后第3天，G5、G6組各有1只動(dòng)物移植皮片周圍感染，其他各組移植皮片均成活良好。G1~G4組細(xì)胞水腫，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，纖維細(xì)胞逐漸增多，G5~G7組上皮化程度越來(lái)越高，纖維細(xì)胞含量越來(lái)越少。各組整合素β-1陽(yáng)性細(xì)胞率低于基因物質(zhì)p63，但隨觀察時(shí)間延長(zhǎng)變化規(guī)律相似。陽(yáng)性細(xì)胞在移植皮片中的排列結(jié)構(gòu)紊亂，分布到表皮各層，從G6組開始逐漸集中于表皮的基底層和毛囊隆突部，但在表皮的其他各層仍然有陽(yáng)性細(xì)胞。G1組陽(yáng)性細(xì)胞率開始逐漸減少，G2組達(dá)到最低，然后逐漸增加，G1～G3組手術(shù)前、后比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；G4組接近術(shù)前（P＞0.05）；G6組達(dá)到最高峰后逐漸降低，G5～G7組手術(shù)前、后比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 表皮干細(xì)胞在自體全層皮片移植成活過(guò)程中，數(shù)量逐漸減少后增加,至超過(guò)正常，后又逐漸減少；在分布上開始紊亂，幾乎分布表皮各層，后又趨向正常規(guī)律性變化。
目的 研究堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 (transforming growth factor β1，TGF-β1)、胰島素樣生長(zhǎng)因子1(insulinlike growth factor 1，IGF-1)單獨(dú)或聯(lián)合作用于人胚半月板細(xì)胞，探討半月板組織工程種子細(xì)胞大量擴(kuò)增最佳作用組合及濃度。方法 無(wú)菌條件下取健康婦女意外流產(chǎn)并自愿捐獻(xiàn)的4個(gè)月人胚半月板，體外分離、培養(yǎng)半月板纖維軟骨細(xì)胞，用Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色和Aggrecan免疫熒光染色檢測(cè)其性狀。取第3代細(xì)胞貼壁后使用血清饑餓法同步化細(xì)胞，加入IGF-1（1、10、50、100 μg/L）、TGF-β1(0.1、1.0、5.0、10.0、50.0 μg/L)、bFGF(5、10、50、100、200 μg/L)作用于半月板細(xì)胞,每樣本設(shè)8個(gè)復(fù)孔和陰性對(duì)照組，分別于作用后48 h和72 h采用MTT法檢測(cè)軟骨細(xì)胞增殖情況，以確定各生長(zhǎng)因子最佳效應(yīng)濃度。同法設(shè)7個(gè)組，每組8個(gè)復(fù)孔，分別為：陰性對(duì)照組、bFGF最佳效應(yīng)濃度組(50 μg/L)、TGF-β1最佳效應(yīng)濃度組(5 μg/L)、IGF-1最佳效應(yīng)濃度組（50 μg/L）、bFGF 和TGF-β1最佳效應(yīng)濃度聯(lián)用組、bFGF和IGF-1最佳效應(yīng)濃度聯(lián)用組、TGF-β1和IGF-1最佳效應(yīng)濃度聯(lián)用組，48 h和72 h用MTT比色法得出吸光度（A）值并分析軟骨細(xì)胞的增殖效應(yīng)。結(jié)果 第3代半月板細(xì)胞擴(kuò)增前后細(xì)胞均表達(dá)Ⅱ型膠原和Aggrecan蛋白。48 h和72 h 50 μg/L IGF-1，5 μg/L TGF-β1及50 μg/L bFGF濃度組與對(duì)照組相比均具有促細(xì)胞增殖作用，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；此即為各生長(zhǎng)因子最佳效應(yīng)濃度。生長(zhǎng)因子聯(lián)用：bFGF 50 μg/L與IGF-1 50 μg/L聯(lián)用、IGF-150 μg/L與TGF-β1 5 μg/L聯(lián)用具有協(xié)同效應(yīng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)； bFGF 50 μg/L與TGF-β1 5 μg/L聯(lián)用無(wú)協(xié)同效應(yīng)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論 bFGF、TGF-β1、IGF-1單獨(dú)使用均可體外擴(kuò)增人胚半月板細(xì)胞，最佳效應(yīng)濃度聯(lián)用時(shí)bFGF/IGF-1、IGF-1/TGF-β1的擴(kuò)增效果優(yōu)于各自單獨(dú)使用，可用于體外大量擴(kuò)增種子細(xì)胞。
目的 探討新型多孔β磷酸三鈣（β tricalcium phosphate,β-TCP）作為骨組織工程支架材料的應(yīng)用效果。方法 將兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（marrow mesenchymal stem cells，MSCs ）與β-TCP復(fù)合培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)組于24孔培養(yǎng)板中每孔加入3 mm×3 mm×3 mm的β-TCP小塊與細(xì)胞混合培養(yǎng)，對(duì)照組單純接種細(xì)胞。培養(yǎng)后至10 d內(nèi)行倒置相差顯微鏡觀察，第6天行掃描電鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況并與對(duì)照組比較；復(fù)合培養(yǎng)3、6、9、12 d MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖情況并與對(duì)照組比較以判斷其細(xì)胞相容性。通過(guò)不同濃度(100%、50%、10%、1%、0)的βTCP浸提液對(duì)細(xì)胞增殖的影響檢驗(yàn)其細(xì)胞毒性。將MSCs誘導(dǎo)為成骨細(xì)胞，并與βTCP復(fù)合修復(fù)兔橈骨1.5 cm大段骨缺損，術(shù)后2、6、12周分別取材通過(guò)組織學(xué)、X線片和放射性核素骨掃描(emission computed tomograph, ECT)檢驗(yàn)其成骨效果。結(jié)果 MSCs細(xì)胞接種后4 h可見部分細(xì)胞貼壁，12 h后完全貼壁，細(xì)胞呈多角形、梭形；8～10 d后匯成單層，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞生長(zhǎng)與對(duì)照組相似。第6天倒置相差顯微鏡和掃描電鏡觀察可見細(xì)胞黏附性良好。MTT法測(cè)定示實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)吸光度（A）值比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。各時(shí)間點(diǎn)不同濃度β-TCP的細(xì)胞毒性均為0級(jí)。組織學(xué)、X線片和ECT均顯示復(fù)合材料能夠修復(fù)兔橈骨的大段骨缺損，且體內(nèi)降解速率與骨的形成速率一致。結(jié)論新型多孔β-TCP具有獨(dú)特的三維立體結(jié)構(gòu)，優(yōu)良的理化性質(zhì)，是一種良好的骨組織工程支架材料。
目的 建立人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（human marrow mesenchymalstem cells ,hMSCs）體外低氧培養(yǎng)及向成骨細(xì)胞分化的生物模型，研究其生物學(xué)特征，為骨組織工程提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法 采用人淋巴細(xì)胞分離液分離健康成人hMSCs，DMEM-LG（含20％胎牛血清）中培養(yǎng)，10～14 d后傳代培養(yǎng)。取第2代細(xì)胞，根據(jù)培養(yǎng)氧濃度及培養(yǎng)基類型分為4組：正常氧組（20％O.2加DMEM-LG，A組）、低氧組（1％O.2加DMEM-LG，B組）、正常氧成骨誘導(dǎo)組（20％O.2加條件培養(yǎng)基，C組）及低氧成骨誘導(dǎo)組（1％O.2加條件培養(yǎng)基，D組），通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞增殖測(cè)定（MTT法）、集落形成檢測(cè)、RT-PCR檢測(cè)、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性檢測(cè)及茜素紅染色，研究低氧環(huán)境對(duì)hMSCs生物學(xué)行為的影響。結(jié)果 與A組相比，B組及D組中的hMSCs有較高的增殖速度，并且不受條件培養(yǎng)基的影響，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。B組中的hMSCs生成的集落逐漸增多，A組9 d后生成的集落數(shù)基本不發(fā)生變化。D組培養(yǎng)的hMSCs 的ALP活性逐漸增高，但明顯低于C組，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。定量RT-PCR檢測(cè)，C組ALP、骨鈣素、Ⅰ型膠原蛋白及骨粘連蛋白mRNA表達(dá)量明顯增加（P＜0.01)。培養(yǎng)4周后，與其他3組相比，C組可見到明顯的鈣鹽沉積和染成紅色的鈣結(jié)節(jié)。結(jié)論 低氧使hMSCs增殖率增加，集落形成能力增強(qiáng)，抑制向成骨細(xì)胞分化。
目的 探討自行合成的骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2，BMP-2)活性多肽對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（marrow mesenchymal stem cells，MSCs）體外定向誘導(dǎo)成骨的能力，評(píng)價(jià)BMP-2活性多肽的成骨誘導(dǎo)性及誘導(dǎo)成骨的劑量依賴性 方法取4周齡Wistar大鼠分離培養(yǎng)MSCs，傳至第3代時(shí)改用條件培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中分別加入濃度為300、200、100、50及0 μg/ml的BMP2活性多肽，并依次記為A、B、C、D和E組。細(xì)胞培養(yǎng)至5、10、15及20 d，檢測(cè)堿性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性，測(cè)定鈣含量，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（fluorescent quantitative PCR，F(xiàn)QPCR)檢測(cè)Ⅰ型膠原、骨橋蛋白 (osteopontin，OPN) 及骨鈣素（osteocalcin，OCN） mRNA的表達(dá)，檢測(cè)不同濃度BMP2活性多肽體外誘導(dǎo)成骨的能力。結(jié)果 倒置相差顯微鏡下觀察，用條件培養(yǎng)基培養(yǎng)3～4 d后，培養(yǎng)細(xì)胞由長(zhǎng)梭形轉(zhuǎn)變?yōu)槎趟笮位蚨嘟切?。隨條件培養(yǎng)基中BMP-2活性多肽濃度的增加，細(xì)胞發(fā)生成骨樣改變的時(shí)間提前。ALP活性和鈣含量檢測(cè)顯示，A組和B組較其他組增加明顯，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），但A、B組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05）。FQ-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)不同濃度條件培養(yǎng)基培養(yǎng)14 d后，Ⅰ型膠原、OPN和OCN mRNA在各組均有表達(dá)。Ct值表明其表達(dá)量的大小順序?yàn)锳、B、C、D組，E組無(wú)表達(dá)，A組和B組的Ct值明顯大于C組和D組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），但A組和B組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05）。結(jié)論 BMP-2活性多肽能有效地促進(jìn)MSCs向成骨方向分化，其誘導(dǎo)作用存在劑量依賴關(guān)系，最佳誘導(dǎo)劑量為200 μg/ml。