目的 比較腺病毒載體Ad-BMP-2-內(nèi)部核糖體進入位點（internal ribosome entry site，IRES）-低氧誘導因子1α突變型（hypoxia inducible factor 1αmu，HIF-1αmu）與Ad-巨細胞病毒（cytomegalovirus，CMV）-BMP-2-IRES-人源化海腎綠色熒光蛋白1（human renilla reniformis green fluorescent protein 1，hrGFP-1）分別轉(zhuǎn)染BMSCs后的成骨效應，優(yōu)化成骨細胞種子來源。 方法取1月齡新西蘭大白兔骨髓分離培養(yǎng)BMSCs。取第3代BMSCs進行病毒液轉(zhuǎn)染，根據(jù)轉(zhuǎn)染病毒液不同將實驗分為4組，A、B、C組分別采用感染復數(shù)（multiplicity of infection，MOI）為50、100、150和200的Ad-BMP-2-IRES-HIF-1αmu、Ad-CMV-BMP-2-IRES-hrGFP-1、Ad-CMV-IRES-hrGFP-1（空腺病毒載體）轉(zhuǎn)染細胞，D組為未被轉(zhuǎn)染的BMSCs。選擇最佳MOI值進行觀察。轉(zhuǎn)染后采用免疫組織化學染色檢測BMP-2表達，Western blot檢測BMP-2和HIF-1α蛋白表達，ALP活性測定和鈣結(jié)節(jié)茜素紅染色檢測細胞成骨分化能力。 結(jié)果A、B、C組最佳MOI值分別為200、150和100。免疫組織化學染色示，A、B組BMP-2染色呈陽性，C、D組呈陰性；A組陽性細胞數(shù)明顯多于B組（P lt; 0.05）。Western blot檢測示，A、B組BMP-2蛋白表達明顯高于C、D組（P lt; 0.05），A組高于B組（P lt; 0.05）；A組HIF-1α蛋白表達明顯高于其余3組（P lt; 0.05），其余3組間差異無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）。A、B組ALP活性明顯高于C、D組（P lt; 0.05），A組高于B組（P lt; 0.05）。茜素紅染色示，A、B組可見明顯鈣結(jié)節(jié)，C、D組未見鈣結(jié)節(jié)形成；且A組鈣結(jié)節(jié)數(shù)量多于B組（P lt; 0.05）。 結(jié)論單載體雙基因Ad-BMP-2-IRES-HIF-1αmu與單載體單基因Ad-CMV-BMP-2-IRES-hrGFP-1分別轉(zhuǎn)染兔BMSCs后，前者BMP-2和成骨效應表達均高于后者。