目的 觀察Crumbs（Crb）蛋白對(duì)斑馬魚視網(wǎng)膜不同種類光感受器細(xì)胞的影響。 方法 27個(gè)月齡野生型斑馬魚及相同月齡Tg（RH2-2:Crb2b-sf-EX/RH2-2:GFP）pt108b轉(zhuǎn)基因斑馬魚（pt108b斑馬魚）眼球標(biāo)本JB-4包埋，以3 μm厚度沿眼球腹-背及鼻-顳（前-后）兩個(gè)方向進(jìn)行切割。收集通過(guò)眼球中央?yún)^(qū)域的3張連續(xù)切片，行福爾根染色。光學(xué)顯微鏡觀察視網(wǎng)膜視桿細(xì)胞以及對(duì)紫外光敏感的視錐細(xì)胞（UV視錐細(xì)胞）、對(duì)紅綠藍(lán)光敏感的視錐細(xì)胞（RGB視錐細(xì)胞）在視網(wǎng)膜不同區(qū)域的細(xì)胞密度。 結(jié)果 野生型斑馬魚視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞在中央?yún)^(qū)細(xì)胞排列最為緊密，周邊區(qū)細(xì)胞排列最為稀疏。與野生型斑馬魚比較，pt108b斑馬魚位于視網(wǎng)膜外核層頂端RGB視錐細(xì)胞密度顯著減少；視網(wǎng)膜中央?yún)^(qū)及中間區(qū)RGB視錐細(xì)胞幾乎完全消失；視桿細(xì)胞頂端部、外限制膜基底部UV視錐細(xì)胞密度維持不變；視網(wǎng)膜外核層基底部視桿細(xì)胞密度顯著增加。 結(jié)論 Crb蛋白能夠影響斑馬魚視網(wǎng)膜不同種類光感受器細(xì)胞的密度。
目的 觀察塞來(lái)昔布對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）表達(dá)的影響。 方法 將36只大鼠用鏈脲佐菌素（STZ）腹腔注射制成糖尿病大鼠模型，隨機(jī)分成糖尿病組(n=18)和塞來(lái)昔布灌胃組(n=18)。塞來(lái)昔布灌胃組大鼠經(jīng)口灌胃塞來(lái)昔布50 mg/kg；糖尿病組經(jīng)口灌胃等體積生理鹽水。另18只正常大鼠為正常對(duì)照組。3個(gè)月后處死全部大鼠，應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)視網(wǎng)膜VEGF蛋白表達(dá)，逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）方法檢測(cè)視網(wǎng)膜VEGF-mRNA和環(huán)氧化酶(COX)-2-mRNA的表達(dá)。 結(jié)果 正常對(duì)照組視網(wǎng)膜VEGF-mRNA和COX-2-mRNA表達(dá)量少，VEGF免疫組織化學(xué)反應(yīng)弱陽(yáng)性，VEGF蛋白表達(dá)量低；糖尿病組較正常對(duì)照組視網(wǎng)膜VEGF-mRNA和COX-2-mRNA表達(dá)均上調(diào)(P＜0.05)，VEGF免疫組織化學(xué)反應(yīng)呈強(qiáng)陽(yáng)性，VEGF蛋白表達(dá)增高(P＜0.01)；塞來(lái)昔布灌胃組較糖尿病組視網(wǎng)膜VEGF mRNA表達(dá)顯著下降(P＜0.05)，COX-2- mRNA的表達(dá)無(wú)顯著降低(Pgt;0.05)，VEGF免疫組織化學(xué)反應(yīng)陽(yáng)性減弱，VEGF蛋白表達(dá)降低(P＜0.01)。 結(jié)論 塞來(lái)昔布可通過(guò)抑制COX-2的活性進(jìn)一步抑制STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠視網(wǎng)膜VEGF-mRNA及蛋白表達(dá)。 (中華眼底病雜志,2007,23:265-268)
目的 觀察基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1alpha;（SDF-1alpha;）在增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變（PDR）繼發(fā)新生血管性青光眼（NVG）中的作用，并探討其作用機(jī)制。方法 采集PDR患者25例31只眼的玻璃體標(biāo)本。其中，繼發(fā)NVG者13只眼作為實(shí)驗(yàn)組，無(wú)NVG者18只眼作為對(duì)照組。配制含10、100、1000 ng/ml SDF-1alpha;和10 ng/ml 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）培養(yǎng)液，并以此分組；測(cè)量各濃度組與體外對(duì)照組人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）管腔樣結(jié)構(gòu)及毛細(xì)血管樣結(jié)構(gòu)全長(zhǎng)。配制含10、100、1000 ng/ml SDF-1alpha;和100 ng/ml 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）培養(yǎng)液，并以此分組；采用5prime;-溴2prime;-脫氧尿嘧啶（BrdU）摻入法行細(xì)胞增生檢測(cè)，分析各濃度組與體外對(duì)照組吸光度［A，舊稱光密度（OD）］值。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)玻璃體標(biāo)本實(shí)驗(yàn)組和玻璃體標(biāo)本對(duì)照組患者玻璃體標(biāo)本中VEGF和SDF-1alpha;含量。結(jié)果 體外血管生成檢測(cè)顯示，10、100、1000 ng/ml SDF-1alpha;和10 ng/ml VEGF組HUVEC管腔樣和毛細(xì)血管樣結(jié)構(gòu)長(zhǎng)度均較體外對(duì)照組長(zhǎng)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。細(xì)胞增生檢測(cè)顯示，10、100、1000 ng/ml SDF-1alpha;和100 ng/ml VEGF組A值均較體外對(duì)照組增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。ELISA法檢測(cè)顯示，玻璃體標(biāo)本實(shí)驗(yàn)組患者玻璃體標(biāo)本中SDF-1alpha;和VEGF含量均明顯高于玻璃體標(biāo)本對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。結(jié)論 SDF-1alpha;參與了PDR繼發(fā)NVG的形成過(guò)程，可能與SDF-1alpha;促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增生而促進(jìn)新生血管形成有關(guān)。