目的 利用抑制消減雜交（suppression subtractive hybridization，SSH）技術(shù)，比較瘢痕疙瘩與正常皮膚組織之間基因表達(dá)差異，篩選瘢痕疙瘩特有的差異表達(dá)基因片段，為揭示瘢痕疙瘩的病因提供實驗依據(jù)。方法 提取瘢痕疙瘩與正常皮膚組織細(xì)胞mRNA，逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。以瘢痕疙瘩cDNA為檢測子，正常皮膚組織細(xì)胞cDNA為驅(qū)動子，選擇四堿基內(nèi)切酶RsaⅠ將cDNA酶切；連接特殊設(shè)計的接頭進(jìn)行消減雜交和PCR反應(yīng)，得到消減混合物，與T載體連接，轉(zhuǎn)化DH5α感受態(tài)細(xì)菌，建立差異消減文庫。Southern雜交篩選鑒定差異基因，進(jìn)行測序和同源分析。結(jié)果 經(jīng)SSH篩選、Southern雜交鑒定得到13個瘢痕疙瘩差異表達(dá)基因，其中已知功能的基因11個，如TA結(jié)合因子1、E4基因轉(zhuǎn)錄因子1、ephrin B2型受體基因、血小板生長因子受體基因等；有與腫瘤發(fā)生有關(guān)的基因，如G抗原7基因等；未知功能基因2個。結(jié)論 篩選得到的瘢痕疙瘩差異表達(dá)基因，對了解瘢痕疙瘩發(fā)生發(fā)展的病因?qū)W基礎(chǔ)和指導(dǎo)臨床治療具有重要意義。
目的 觀察腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因nm23的表達(dá)產(chǎn)物二磷酸核苷激酶（nucleoside diphosphat kinase，NDPK）在裸小鼠玻璃體腔視 網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤（retinoblastoma, RB）移植瘤中的表達(dá)狀態(tài)，探討nm23基因的表達(dá)產(chǎn)物 NDPK（nm23/NDPK）與RB的發(fā)生發(fā)展及浸潤生長的相關(guān)性。 方法 對20例裸小鼠玻璃體RB移植瘤進(jìn)行nm23／NDPK表達(dá)的免疫組織化學(xué)染色，以正常視網(wǎng)膜組織標(biāo)本作對照，比較RB移植瘤眼內(nèi)生長期（Ⅰ～Ⅲ級）及蔓延、擴(kuò)展浸潤期（Ⅳ ～Ⅴ級）nm23／NDPK的表達(dá)情況。 結(jié)果 正常視網(wǎng)膜組織nm23蛋 白表達(dá)陰性。20例RB移植瘤nm23／NDPK表達(dá)陽性，陽性細(xì)胞數(shù)為48．73plusmn;2．37，陽性表達(dá)率為100%；眼內(nèi)生長期（Ⅰ～Ⅲ級）與蔓延、擴(kuò)展浸潤期（Ⅳ～Ⅴ級） nm23/NDPK陽性表 達(dá)細(xì)胞數(shù)差異無顯著性的意義(Pgt;0.05)。 結(jié)論 nm23基因不具有抑制RB移植瘤蔓延浸潤的功能，而是在其發(fā)生發(fā)展過程中起一定作用。 (中華眼底病雜志,2001,17:47-49)
【摘要】目的通過RNA干擾(RNAi)沉默HER2基因在涎腺黏液表皮樣癌Mc3細(xì)胞中的表達(dá)方法將目的基因靶序列小干擾RNA(siRNA)轉(zhuǎn)染Mc3細(xì)胞,并設(shè)置對照組,采用RTPCR、免疫組化檢測RNA干擾后HER2基因在Mc3細(xì)胞中的表達(dá)情況。結(jié)果RTPCR結(jié)果顯示RNA干擾后,HER2基因mRNA在涎腺黏液表皮樣癌細(xì)胞中的表達(dá)與對照組比較明顯降低;免疫組化實驗結(jié)果顯示RNA干擾后HER2基因蛋白在涎腺黏液表皮樣癌細(xì)胞中的表達(dá)降低,與mRNA表達(dá)情況相一致。結(jié)論RNA干擾成功抑制了涎腺黏液表皮樣癌細(xì)胞中HER2基因的表達(dá),為口腔涎腺黏液表皮樣癌針對癌基因HER2為靶基因的基因治療提供研究基礎(chǔ)。
目的：研究青蒿琥酯誘導(dǎo)人胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡作用及其可能機(jī)制.方法：應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)（FCM）、透射電鏡（TEM）等方法檢測不同濃度下青蒿琥酯對人胃癌SGC-7901細(xì)胞生長的影響，并應(yīng)用Western Blot法檢測凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax的表達(dá)水平。結(jié)果：經(jīng)青蒿琥酯處理后，人胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡率升高，并具有時間濃度依賴性（Plt;0.05），癌細(xì)胞被阻滯于G0/G1期；電鏡觀察腫瘤組織中散在凋亡細(xì)胞及凋亡小體；Western Blot法檢測到凋亡相關(guān)基因Bcl-2表達(dá)減弱，Bax表達(dá)增強(qiáng)（Plt;0.05）。結(jié)論：青蒿琥酯能有效抑制人胃癌SGC7901細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡，其機(jī)制可能與下調(diào)凋亡相關(guān)基因Bcl-2、上調(diào)Bax表達(dá)有關(guān)。