目的 探討Livin 在非小細胞肺癌( NSCLC) 中的表達, 及與NSCLC 病理、生物學行為指標和預后的關系。方法 采用免疫組織化學法檢測87 例NSCLC 腫瘤組織和40 例肺良性組織中 Livin、Caspase-3 和Bcl-2 蛋白的表達情況, 將其表達與NSCLC 病理、生物學行為等指標進行相關分析。多因素COX 回歸生存分析探討Livin、Caspase-3 和Bcl-2 蛋白表達水平與預后的關系。結果 Livin 和Bcl-2 蛋白在肺癌組織中的表達明顯高于在肺良性病變組織中的表達( 72. 41% 比0. 0% ,74. 71% 比0. 0%, P = 0. 000) , Caspase-3 蛋白表達則明顯降低( 67. 82% 比87. 5% , P lt; 0. 05) 。Livin、Caspase-3 和Bcl-2 表達主要位于胞漿, 未見核內表達。其表達與肺癌的組織細胞類型、分化程度、淋巴結轉移、TNM分期、腫瘤大小以及部位無明顯相關性。在NSCLC 中, Livin 蛋白表達與Caspase-3 和Bcl-2 蛋白表達有相關性( r1 = - 0. 260, P = 0. 015; r2 =0. 351, P =0. 001) 。Livin、Caspase-3 和Bcl-2 不是影響肺癌手術患者預后的獨立預后因素。結論 Livin 蛋白、Bcl-2 蛋白在肺癌組織中表達上調,Livin 的表達與Caspase-3、Bcl-2 蛋白的表達呈相關性, 三者在肺癌的發(fā)生發(fā)展中可能起協同作用。Livin、Bcl-2 和Caspase-3 蛋白表達與患者的預后無明顯關系。
目的 探討凋亡抑制基因Livin在食管癌組織中的表達及其與P53和Bcl-2表達的關系。 方法 采用逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)結合銀染技術檢測36例食管癌組織和18例癌旁正常組織中Livin mRNA的表達，采用免疫組織化學鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化酶（S-P）法檢測食管癌組織中Livin、P53和Bcl-2蛋白的表達。 結果 RT-PCR檢測結果顯示:Livin mRNA在食管癌組織中的陽性表達較癌旁正常組織明顯增強,兩種異構體基本同時表達。免疫組織化學檢測結果顯示:Livin 蛋白在食管癌組織中的陽性表達率明顯高于癌旁正常組織(Plt;0.01)。癌組織侵及食管外膜的Livin陽性表達率高于癌組織侵及食管肌層者(Plt;0.05);有淋巴結轉移者的Livin陽性表達率高于無淋巴結轉移者(Plt;0.05) 。Livin蛋白表達與P53蛋白表達無關（χ2=1.00,P=0.505）,與Bcl-2蛋白表達有關（χ2=10.60，P=0.003）。 結論 Livin在食管癌組織中異常表達，有望成為食管癌診斷和基因治療的新靶點。凋亡相關基因Bcl-2與Livin基因的異常表達可能在食管癌癌變中起協調作用。
目的探討大鼠脊髓缺血再灌注損傷（spinal cord ischemia/reperfusion injury，SCII）后脊髓細胞熱休克蛋白27（heat shock protein 27，HSP27）與凋亡相關基因Bax、Bcl-2蛋白的表達及其相互關系。 方法成年雄性SD大鼠70只，體重200～220 g，隨機分為假手術組和SCII組，每組35只。假手術組僅顯露左腎動脈，不夾閉腹主動脈；SCII組夾閉大鼠腹主動脈20 min，于缺血后4、8、12 h及1、2、3、5 d分別取5只大鼠進行再灌注處理。各時間點再灌注后處死大鼠取脊髓組織，采用免疫組織化學染色檢測HSP27、Bax、Bcl-2蛋白的相對表達量。 結果SCII組HSP27于4 h時開始表達，3 d達高峰，5 d表達減少；在3 d及5 d時相對表達量與其他各時間點比較，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。Bcl-2于4 h開始表達，1 d達高峰，2 d時仍維持高表達狀態(tài)，之后逐漸減少；1、2 d時相對表達量與其他各時間點比較，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。Bax的表達分別在12 h和3 d達高峰，5 d表達減少；12 h、3 d時相對表達量與其他各時間點比較，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。假手術組各時間點各蛋白僅少量表達，SCII組HSP27、Bax、Bcl-2蛋白的相對表達量均明顯高于假手術組（P lt; 0.05）。 結論SCII后脊髓神經可能存在自行修復時間窗，HSP27對SCII組織產生保護效應的可能機制是促進脊髓組織抗凋亡蛋白Bcl-2表達，減少促凋亡蛋白Bax表達，以抑制脊髓組織細胞凋亡，從而發(fā)揮其保護作用。
【摘 要】 目的 通過營養(yǎng)剝奪模擬體內髓核細胞退變微環(huán)境，檢測Bcl-2/ 腺病毒干擾蛋白3（Bcl-2/adenovirusE1B 19-kDa-interacting protein 3，BNIP3）表達及線粒體轉位情況，為進一步探索髓核細胞退變死亡機制提供實驗依據。 方法 成年清潔級SD 大鼠2 只，雌雄不限，體重150 ～ 200 g。體外分離獲取鼠尾椎間盤髓核細胞，將傳代后細胞分別置入正常環(huán)境（對照組：L-DMEM 培養(yǎng)基、10%FBS、21%O2）和營養(yǎng)剝奪環(huán)境（實驗組：DMEM 無糖無血清培養(yǎng)基、 1% O2）培養(yǎng)24、48、72 h 后，實時熒光定量PCR、細胞免疫熒光染色及Western blot 檢測BNIP3 基因及蛋白表達，流式細胞儀檢測凋亡率及線粒體膜電位。 結果 實時熒光定量PCR、細胞免疫熒光染色及Western blot 檢測顯示對照組細胞低表達BNIP3；實驗組隨培養(yǎng)時間延長，BNIP3 表達呈上升趨勢，且BNIP3 與線粒體相結合；除培養(yǎng)后24 h 實驗組BNIP3 基因表達與對照組比較差異無統計學意義（P gt; 0.05）外，其余各時間點實驗組BNIP3 基因及蛋白表達與對照組比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。流式細胞儀檢測顯示，對照組細胞凋亡率較低，且細胞保持較高的線粒體膜電位；而實驗組隨培養(yǎng)時間延長細胞凋亡率增加、線粒體膜電位降低，與對照組比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。 結論 營養(yǎng)剝奪可能通過誘導BNIP3 表達增加并結合線粒體導致線粒體功能障礙，最終導致髓核細胞死亡。
目的 系統評價國內有關Bcl-2在急性白血病不同病理狀態(tài)中的表達及其與化療效果的關系。方法 計算機檢索CBMdisc、中文科技期刊全文數據庫、萬方數據庫、中國期刊網專題全文數據庫、中國優(yōu)秀碩士學位論文全文數據庫、中國博士學位論文全文數據庫，并輔以文獻追溯的方法，收集國內公開發(fā)表的所有相關病例對照、隊列研究。檢索年限均為從建庫至2010年5月23日。按納入排除標準篩選文獻并評價納入研究的質量后，采用RevMan 5.0軟件進行Meta分析。結果 共納入10個研究，合計545例患者。Meta分析結果顯示：Bcl-2陽性的急性白血病患者化療后完全緩解率低于Bcl-2 陰性患者，其差異有統計學意義［OR=0.26，95%CI（0.14，0.46），Plt;0.0001］； 急性淋巴細胞白血病與急性非淋巴細胞白血病患者Bcl-2陽性率差異無統計學意義［OR=0.87，95%CI（0.46，1.65），P=0.68］；急性白血病患者化療后完全緩解（CR）患者Bcl-2陽性率明顯低于部分緩解者/完全不緩解者，其差異有統計學意義［SMD= –0.87，95%CI（–1.53，–0.20），P=0.01］。結論 現有國內證據表明，Bcl-2表達與急性白血病患者緩解率呈顯著負相關關系，Bcl-2基因的表達水平可用于急性白血病患者化療效果考核和預后評價研究。但該結論需要更多高質量的研究進一步證實。
【摘要】目的探討三七總皂苷（PNS）預處理對大鼠供肝缺血-再灌注損傷的保護作用及其對供肝細胞凋亡和Bcl-2及Caspase-3 mRNA表達的影響。方法雄性SD大鼠分別用作供、受體，采用Kamada’s袖套法建立原位肝移植模型，根據供肝切取前1 h是否靜脈注射PNS（50 mg/kg）將大鼠隨機分為PNS預處理組（PNS組）和生理鹽水對照組（NS組）； 另設假手術作對照組（SO組）。分別于供肝再灌注后 2 h、6 h及24 h處死各組動物，檢測血清ALT及AST，HE切片作病理組織學檢查，TUNEL法檢測肝細胞凋亡，RT-PCR法檢測Bcl-2及Caspase-3 mRNA的表達。結果供肝再灌注后2 h、6 h及24 h各時點，PNS組大鼠血清ALT和AST水平及肝細胞凋亡指數（AI）均明顯低于NS組（P＜0.05，P＜0.01）； 6 h及24 h，PNS組大鼠肝組織Bcl-2 mRNA的表達水平明顯高于NS組（P＜0.05）； 2 h及6 h，PNS組大鼠肝組織Caspase-3 mRNA的表達水平明顯低于NS組（P＜0.05）。結論PNS預處理大鼠供肝，可以有效地減輕移植肝的缺血/再灌注損傷和細胞凋亡，影響細胞凋亡調控基因Bcl-2和 Caspase-3的表達。這可能為PNS抗細胞凋亡的機理之一。
目的研究乳腺浸潤性導管癌組織中活化白細胞黏附分子（ALCAM/CD166）的表達及其與凋亡抑制蛋白Bcl-2及增殖細胞核抗原Ki-67的關系，探討ALCAM/CD166在乳腺浸潤性導管癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。 方法應用免疫組織化學ElivisionTM Plus二步法檢測96例乳腺浸潤性導管癌組織和30例癌旁非瘤乳腺上皮組織中ALCAM/CD166及Bcl-2、Ki-67蛋白表達的情況，分析ALCAM/CD166蛋白表達與乳腺浸潤性導管癌患者的年齡、腫瘤直徑、組織病理學分級、淋巴結轉移及TNM分期的關系以及其與Bcl-2、Ki-67的相關性。 結果①在96例乳腺浸潤性導管癌中ALCAM/CD166蛋白表達陽性率為79.2%（76/96），明顯高于其在癌旁非瘤乳腺上皮組織中的10.0%（3/30），差異有統計學意義（P＜0.01）。②ALCAM/CD166蛋白陽性表達與乳腺浸潤性導管癌患者的年齡、腫瘤直徑、組織病理學分級及TNM分期均無關（P＞0.05），與腋窩淋巴結轉移有關（P＜0.05）。③乳腺浸潤性導管癌組織中ALCAM/CD166蛋白表達與Bcl-2蛋白表達呈正相關（rs=0.307，P=0.001），而與Ki-67蛋白表達無關（rs=0.064，P=0.475）。 結論ALCAM/CD166蛋白表達與乳腺浸潤性導管癌細胞凋亡及轉移有關，可能成為判斷腫瘤生物學行為和患者預后的重要參考指標之一。
目的探討胃轉流術對2型糖尿病大鼠腎臟早期損害的保護作用及其可能的作用機理。 方法采用高脂飲食加腹腔注射小劑量（35 mg/kg）鏈脲佐菌素（streptozocin，STZ）方法建立2型糖尿病大鼠模型。將造模成功的糖尿病大鼠按數字表法隨機分為3組：糖尿病對照組（n=8）、假手術組（n=8）和Roux-en-Y胃旁路手術組（n=14）；另取正常SD大鼠作為正常對照組（n=8）。分別于術前和術后8周檢測各組大鼠的空腹血糖、血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）和游離脂肪酸（FFA）水平；于術前和術后4及8周測定各組大鼠血清尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）；于術前和術后8周測定各組大鼠24 h尿微量白蛋白和尿8-羥基脫氧鳥酐；于術后8周取腎組織進行病理組織學觀察，計算腎重指數、腎小球平均截面積(MGA)及腎小球平均體積(MGV)，并采用免疫組化方法檢測腎組織纖連蛋白（FN）、Ⅳ型膠原（CoⅣ）、轉化生長因子-β1（TGF-β1）、細胞間黏附分子-1（ICAM-1）、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4（NOX4）和Bcl-2蛋白的表達。 結果Roux-en-Y胃旁路術能顯著降低糖尿病大鼠血糖、血脂、腎重指數、MGA和MGV（P＜0.05），改善腎臟病理形態(tài)和腎臟功能（P＜0.05），減少FN及CoⅣ蛋白的表達，降低TGF-β1、NOX4和ICAM-1在腎臟皮質的表達，同時增加Bcl-2蛋白的表達（P＜0.05）。 結論胃旁路術可改善糖尿病大鼠的腎臟功能，改善其病理損害，其機理可能與抑制TGF-β1、NOX4和ICAM-1蛋白的表達和上調Bcl-2蛋白的水平有關。
目的 觀察大鼠脊髓圓錐損傷后大腦排尿功能區(qū)結構變化和 Bcl-2 的表達情況，探討大腦排尿功能區(qū)退變的可能因素。 方法 成年雌性 SD 大鼠 36 只，隨機分為實驗組（n=30）和對照組（n=6）。實驗組將大鼠 L4 以下脊神經切斷制作脊髓圓錐損傷模型，對照組不作任何處理。實驗組大鼠手術全部成功，術后 3、5 個月分別死亡 1 只大鼠，原因可能是腎功能衰竭及尿路感染。實驗組于術后 1 d、1 周以及 1、3、6 個月分別處死 6、6、6、5、5 只大鼠，對照組相同時間點各處死 1 只大鼠，取腦橋被蓋背外側部組織，行 HE 染色和 Bcl-2 免疫組織化學 SP 染色觀察。 結果 HE 染色示，術后 1 d，實驗組和對照組無明顯區(qū)別，神經元細胞密集，排列整齊，核仁清楚；1 周，實驗組可見神經元細胞周圍間隙稍增寬；1 個月，實驗組部分神經元出現細胞核固縮；3、6 個月，實驗組細胞核固縮的細胞越來越多，甚至部分細胞出現核消失。Bcl-2 免疫組織化學 SP 染色示，對照組 Bcl-2 表達呈弱陽性。實驗組術后 1 d 即出現 Bcl-2 陽性表達，術后 7 d Bcl-2 陽性表達較對照組明顯升高，并達高峰，術后 1、3、6 個月 Bcl-2 陽性表達逐漸下降，但仍高于對照組。 結論 大鼠脊髓圓錐損傷后大腦排尿中樞出現組織退變、細胞壞死，Bcl-2 表達升高可能與組織修復、大腦功能重塑有關。
目的檢測 Notch 信號通路在激活和失活狀態(tài)下，鼠膝骨關節(jié)軟骨細胞中 Notch1、Bax 和 Bcl-2 基因的表達情況，探討 Notch 信號通路在大鼠膝骨關節(jié)炎（osteoarthritis，OA）軟骨細胞凋亡中的作用機制。方法選取 34 只無特定病原體級 Sprague Dawley 大鼠，其中 32 只使用 Hulth 方法制造右膝 OA 模型，余下 2 只正常飼養(yǎng)。4 周后，造模大鼠隨機選擇 2 只以及正常飼養(yǎng)的 2 只大鼠全部處死，觀察右膝軟骨的形態(tài)變化，并進行病理檢查證實造模成功，余下的 30 只大鼠隨機分成激活組、抑制組、空白對照組，每組 10 只。于每周星期二、五行大鼠膝關節(jié)腔注射，其中激活組注射 Nocth 信號通路特異性激活劑 Jagged1 蛋白 25 ng/kg，抑制組注射 γ 分泌酶抑制劑 DAPT（GSI-IX）100 ng/kg，空白對照組注射同體積磷酸鹽緩沖液。關節(jié)腔注射 8 周后全部處死大鼠，取右膝股骨髁關節(jié)骨軟骨標本，大體觀察 3 組大鼠膝關節(jié)軟骨的退變程度，行光學顯微鏡下組織形態(tài)學觀察及 Mankin 評分，并采用免疫組織化學檢測各組軟骨細胞中 Notch1、Bax 和 Bcl-2 蛋白的表達情況。結果關節(jié)腔注射 8 周后，抑制組、空白對照組、激活組 Mankin 評分分別為（3.40±0.84）、（6.70±0.95）、（11.10±1.37）分，組間兩兩比較差異均有統計學意義（P<0.05）。抑制組大鼠膝關節(jié)軟骨的 Notch1、Bax 陽性率均低于空白對照組及激活組（P<0.05），Bcl-2 陽性率高于空白對照組及激活組（P<0.05）。結論Notch 信號通路激活后可能通過凋亡途徑上調 Bax 蛋白，下調 Bcl-2 蛋白，從而促進軟骨細胞凋亡，加重 OA；Notch 信號通路抑制后可能通過凋亡途徑下調 Bax 蛋白，上調 Bcl-2 蛋白，從而抑制軟骨細胞凋亡，減輕 OA 發(fā)展。