目的 探討胃癌組織中第10號染色體同源缺失性磷酸酶-張力蛋白（PTEN）、Fas/FasL和基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）的表達及其與胃癌生物學行為的關系。方法 選擇臨床及病理資料齊全的胃癌蠟塊標本75例，另取正常胃黏膜組織15例作對照，采用SP免疫組化方法檢測PTEN、Fas/FasL和MMP-2在其中的表達。采用χ2檢驗和相關分析作統(tǒng)計學分析。結果 PTEN、Fas/FasL及MMP-2的表達與胃癌的浸潤深度、淋巴結轉(zhuǎn)移、TNM分期及腫瘤的組織分化程度均有關（Plt;0.05）。PTEN和Fas/FasL的表達呈正相關（r=0.401，Plt;0.001），MMP-2與Fas/FasL的表達呈負相關（r=－0.720，Plt;0.001），MMP-2與PTEN的表達呈負相關（r=－0.336，Plt;0.001）。結論 胃癌組織中PTEN、Fas/FasL及MMP-2的表達陽性率可以成為胃癌診斷和預后的判斷指標。
目的 了解HBx基因在乙肝病毒相關性肝癌形成與發(fā)展中的分子機理。方法綜合國外近5年的文獻進行分析。結果 HBx具有促進細胞惡性轉(zhuǎn)化、抑制受損DNA的修復、反式激活、抑制wtp53功能和抑制細胞凋亡等生物學功能。HBx可能通過直接致癌作用、抑制DNA的修復、抑制wtp53、干擾Fas/CD95系統(tǒng)和抑制Caspase-3 活性等分子機理，誘發(fā)肝癌形成和促進肝癌發(fā)展。結論 HBx及其編碼的蛋白HBxAg具有廣泛的生物學功能，從多方面、多途徑促進肝癌的形成和發(fā)展。
目的 研究FasL基因轉(zhuǎn)染樹突狀細胞（DC）對屋塵螨致敏/激發(fā)小鼠氣道炎癥的影響。方法 將FasL基因轉(zhuǎn)染的DC和對照DC（未轉(zhuǎn)染DC）分別經(jīng)氣管注入屋塵螨致敏/激發(fā)小鼠體內(nèi)，病理切片觀察小鼠肺部炎癥，取支氣管肺泡灌洗液（BALF），行BALF細胞總數(shù)及分類計數(shù)，ELISA檢測BALF的白細胞介素-4（IL-4）、IL-5和g干擾素（IFN-g）水平。結果 FasL基因轉(zhuǎn)染的DC過繼處理屋塵螨致敏/激發(fā)小鼠，能顯著地減輕致敏/激發(fā)小鼠氣道變應性炎癥，減少BALF中細胞總數(shù)和嗜酸粒細胞比例，降低BALF中IL-4和IL-5的水平，增高IFN-?水平。結論 FasL基因轉(zhuǎn)染的DC過繼處理屋塵螨致敏/激發(fā)小鼠能抑制Th2細胞活化，抑制變應性氣道炎癥。
目的 探討重組的人胰島素樣生長因子1( rhIGF-1) 對COPD 大鼠膈肌凋亡的保護作用, 并觀察其對肺功能的影響。方法 45 只雄性Wistar 大鼠隨機分為對照組、模型組和干預組, 每組 15 只。模型組和干預組大鼠置于煙霧濃度為5% 的密閉熏箱內(nèi)( 每天30 min, 共28 d) , 第1 d 和第 14 d向氣管內(nèi)注射脂多糖200 μg。干預組大鼠同時每日皮下注射rhIGF-1( 60 μg /100 g) 1 次, 持續(xù) 28 d。對照組不予特殊處理。第1、14、28 d 各組隨機取5 只大鼠處死, 測定各組離體膈肌的重量、細胞凋亡率、膈肌中Fas 基因及蛋白表達水平。第28 d 處死前測定各組大鼠的肺功能。結果 28 d 后模型組和干預組大鼠分鐘呼氣量( VE ) 、最大呼氣流速( PEF) 、深吸氣量( IC) 、第0. 3 s 用力呼氣容積 ( FEV0. 3 ) 及膈肌質(zhì)量均較對照組下降( P lt;0. 05) 。干預組膈肌質(zhì)量、IC 及VE 值高于模型組( P 均lt; 0. 05) , PEF 和FEV0. 3 與模型組比較無顯著差異( P gt; 0. 05) 。第14 和28 d, 干預組膈肌細胞凋亡率、 Fas 基因及蛋白表達均低于模型組( P 均lt;0. 05) , 仍高于對照組( P 均lt; 0. 05) 。結論 Fas / FasL 介導的凋亡途徑參與了膈肌凋亡的發(fā)生, rhIGF-1 可能通過干預Fas / FasL 途徑減少膈肌凋亡, 在一定程度上改善COPD 大鼠的VE 和IC 值。
目的 觀察Fas 相關死亡域樣白介素1β轉(zhuǎn)換酶抑制蛋白( FLIP) 重組體腺病毒滴鼻吸入對大鼠肺組織FLIP表達的影響以及對急性肺損傷( ALI) 的防治效果。方法 48 只SD 大鼠隨機分為4 組, 每組12 只。FLIP治療組: 脂多糖( LPS) 腹腔注射法建立大鼠ALI 模型, 制模后給予Ad-FLIP腺病毒滴鼻吸入; FLIP 預防組: 先以Ad-FLIP 腺病毒感染大鼠然后復制ALI 模型。對照治療組和對照預防組則分別在制模之后和之前, 給予增強型綠色熒光蛋白( EGFP) 腺病毒載體作為對照。觀察各組大鼠的一般情況和肺大體標本, 光鏡下觀察肺組織病理學改變, 測定肺組織濕干重比( W/D) 和肺通透性指數(shù)( LPI) 。采用RT-PCR、免疫組化法檢測并比較各組肺組織FLIP 的表達水平。結果 FLIP治療組和預防組與各對照組相比, 大鼠一般情況較好, 肺大體標本和組織病理學改變減輕, 肺組織濕干重比、肺通透性指數(shù)降低, 肺組織FLIP 的mRNA 和蛋白表達水平均顯著增高( P lt; 0. 01) 。結論 滴鼻吸入FLIP 重組體腺病毒能夠上調(diào)大鼠肺組織的FLIP 表達, 保護肺呼吸膜, 減輕肺水腫,對大鼠ALI 有一定防治作用。
目的 探討早期膿毒癥患者血漿中可溶性Fas 受體( sFas) 、可溶性Fas 配體( sFas-L)及基質(zhì)金屬蛋白酶7( MMP-7) 水平與患者病情嚴重程度及預后的關系。方法 采用酶聯(lián)免疫吸附( ELISA) 法測定并比較32 例膿毒癥患者及24 例年齡性別匹配的健康對照組血漿中sFas、sFas-L、sFas/ sFas-L 比值和MMP-7 的水平差異。根據(jù)膿毒癥患者的28 d預后不同分為生存組和死亡組, 比較兩組之間各指標的差異。結果 膿毒癥患者血漿sFas、sFas-L和MMP-7 水平均較正常對照組明顯升高, 差異均具有統(tǒng)計學意義( P 均lt;0. 01) 。sFas 和sFas-L與患者疾病嚴重程度評分急性生理學和慢性健康狀況評分系統(tǒng)Ⅱ ( APACHEⅡ) 及序貫器官衰竭( SOFA) 呈正相關。MMP-7 與APACHEⅡ評分、SOFA 評分之間存在較弱的負相關, 但無統(tǒng)計學意義( P gt;0. 05) 。與存活患者相比, 死亡患者血漿中的sFas-L 水平明顯升高, 而sFas / sFas-L 比值則明顯降低( P lt;0. 05) 。結論 膿毒癥患者病情嚴重程度與血漿中sFas、sFas-L 及MMP-7 水平密切相關, 這些指標有望成為判斷膿毒癥預后的生物標志物。
目的通過環(huán)扎法制備大鼠急性脊髓損傷（spinal cord injury，SCI）模型，研究不同時間點減壓后細胞凋亡基因Fas的表達規(guī)律及與神經(jīng)功能恢復的關系。 方法13周齡雄性SD大鼠100只，體重255～376 g，隨機分為4組，每組25只。A組為對照組，僅行椎板切除；B、C、D組均采用環(huán)扎法建立急性SCI模型，B、C組分別于術后8、72 h行脊髓減壓，D組術后不行脊髓減壓。于術后1、3、7、14、21 d采用BBB評分及斜板實驗評分評價神經(jīng)功能恢復情況；處死動物取材行HE染色、免疫組織化學染色觀察Fas表達，TUNEL標記觀察細胞凋亡水平。 結果A組術后各時間點BBB評分和斜板實驗評分均明顯優(yōu)于B、C、D組，3、7、14、21 d時B組優(yōu)于C、D組，C組優(yōu)于D組，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。A組各時間點脊髓組織結構及形態(tài)清楚，未見出血、水腫和變性壞死的神經(jīng)元。術后1 d，B、C、D組脊髓組織明顯出血、水腫，可見神經(jīng)元死亡，D組較顯著；3、7 d，B組細胞變性較C、D組輕；14、21 d，B組損傷區(qū)可見較少膠質(zhì)細胞，有纖維母細胞增生和修復現(xiàn)象，C、D組脊髓內(nèi)有部分壞死、囊腔及空洞形成。A組術后各時間點均少見Fas和TUNEL陽性細胞；B、C、D組術后各時間點均見Fas和TUNEL陽性細胞，3 d達峰值，7 d 表達減弱，21 d仍有表達；其中D組陽性細胞數(shù)最多，B組少于C、D組，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。 結論SCI后早期減壓有利于大鼠神經(jīng)功能的恢復， Fas信號通道可能在誘導SCI后神經(jīng)細胞凋亡的過程中發(fā)揮重要作用。
目的 糖皮質(zhì)激素會破壞軟骨，通過觀察地塞米松對人骨關節(jié)炎軟骨細胞（human articularchondrocytes，HACs）凋亡及Fas/FasL 基因表達的影響，探討其促進HACs 凋亡的作用機制。 方法 取行人工膝關節(jié)置換的膝骨關節(jié)炎患者自愿捐贈軟骨組織，體外分離培養(yǎng)HACs，取第2 代細胞進行實驗。將HACs 分別置于含濃度為0.125、1.25、12.5、25 及50 μg/mL 地塞米松培養(yǎng)液中，培養(yǎng)48 h 后采用MTT 法選擇地塞米松最佳工作濃度進行后續(xù)實驗。將HACs 分別采用最佳工作濃度地塞米松（實驗組）及不含地塞米松培養(yǎng)液（對照組）培養(yǎng)，0、24、48 h 后行TMRE/Hoechst/Annexin V-FITC/7-AAD 四重染色檢測細胞凋亡，48 h 后行實時定量PCR 檢測Fas/FasL mRNA 表達，0、24、48 h后行免疫組織化學染色檢測Fas/FasL 蛋白表達。 結果 25 μg/mL 濃度組細胞抑制率顯著高于50 μg/mL 濃度組，差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）；與其他濃度組比較，差異亦有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）；選擇25 μg/mL 濃度作為后續(xù)實驗工作濃度。培養(yǎng)0、24、48 h，實驗組HACs 凋亡細胞百分比分別為5.8% ± 0.3%、27.0% ± 2.6%、36.0% ± 3.1%，呈明顯時間依賴性（P lt; 0.05）。培養(yǎng)48 h 后實驗組及對照組Fas mRNA 相對表達量分別為（8.93 ± 1.12）× 10—3 及（3.31 ± 0.37）× 10—3，F(xiàn)asLmRNA 相對表達量分別為（5.92 ± 0.66）× 10—3 及（2.31 ± 0.35）× 10—3，兩組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。隨培養(yǎng)時間延長，實驗組Fas 及FasL 蛋白表達逐漸增加，且各時間點均顯著高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。 結論 地塞米松可促進HACs 細胞凋亡及上調(diào)凋亡基因Fas/FasL 表達，為進一步探討Fas/FasL 信號通路在地塞米松促HACs 凋亡中的作用提供了實驗依據(jù)。
目的 探討瘢痕疙瘩家系標本中Fas基因 (外顯子7～9)有無突變以及Fas基因突變在瘢痕疙瘩形成中的意義。方法 實驗標本來自南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院整形外科2005年收集的A、B兩個瘢痕疙瘩家系。采用PCR及基因測序技術，分別以A家系2例男性患者的瘢痕疙瘩組織為研究對象, 以其周圍正常皮膚及外周靜脈血作為自身對照，其配偶的外周靜脈血作為正常對照，并以B家系2例患者(母親與兒子)的外周靜脈血作為不同家系之間的對照，共檢測10份標本中Fas基因外顯子7～9基因序列。結果 10份瘢痕疙瘩家系標本Fas基因的7、8外顯子均未發(fā)生突變，2例瘢痕疙瘩組織標本均在外顯子9編碼區(qū)的11 bp和53 bp兩個位點上存在單個堿基基因突變或多態(tài)性改變。結論 瘢痕疙瘩Fas基因死亡域外顯子9區(qū)段的基因結構異常，極有可能與Fas蛋白的功能改變有關，從而導致局部瘢痕疙瘩形成。
目的 應用成功制備的攜帶人Fas基因的兩種重組腺病毒，感染瘢痕疙瘩(keroid,K)成纖維細胞(fibroblasts, FB)，使其穩(wěn)定高效地表達以替換原有無功能的Fas蛋白，并恢復正常的重建后Fas信號傳導通道。 方法 腺病毒感染KFB后，檢測及比較兩種腺病毒轉(zhuǎn)染前后，KFB內(nèi)Fas蛋白的表達變化、蛋白功能以及細胞增殖凋亡狀況。 結果 腺病毒感染后的KFB均能穩(wěn)定提高Fas蛋白的表達,并且在Fas單克隆抗體的誘導下可以發(fā)生明顯的細胞凋亡。 結論 ①構建的兩種重組腺病毒AdFas在體外實驗中能有效地提高KFB蛋白的表達,并可以重建原來阻斷的死亡信號傳導通道；②細菌內(nèi)重組腺病毒體外治療效果更佳；③再次估證了Fas基因突變與K之間的聯(lián)系，為K基因治療展示了一條新途徑。